基因連線酶

基因連線酶是一種封閉DNA鏈上缺口酶,藉助ATP或NAD水解提供的能量催化DNA鏈的5'-PO4與另一DNA鏈的3'-OH生成磷酸二酯鍵。但這兩條鏈必須是與同一條互補鏈配對結合的(T4DNA連線酶除外),而且必須是兩條緊鄰DNA鏈才能被DNA連線酶催化成磷酸二酯鍵。

基因連線酶有T4噬菌體DNA連線酶、T4噬菌體RNA連線酶、大腸埃希菌DNA連線酶等。DNA連線酶可連線平端,也連線粘端。反應需有Mg和ATP存在,pH7.5-7.6。最適溫度37℃,30℃以下活性明顯下降,但考慮到被連線DNa 的穩定性和粘性末端的退火溫度,一般平端連線用20-25℃,粘端連線用12℃左右。

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