基因探針型晶片

基因探針型晶片是根據探針類型可分為寡核苷酸微陣列晶片和 cDNA微陣列晶片。寡核苷酸微陣列晶片在 製作上可以分為在片法和離片法。cDNA微 陣列晶片是由固定於基質材料上的cDNA 片段組成的微陣列,這種核酸片段通常是純 化後的PCR產物,未知序列的cDNA靶分 子標記後(如螢光標記)與晶片上的探針分 子雜交,通過雷射共聚焦螢光掃瞄器或電荷 耦合器件(CCD)對螢光信號的強度進行檢測,從而對雜交結果進行定量分析。

cDNA 晶片的發展與雙色螢光探針雜交系統的建立有密切關係。將兩個不同樣品的mRNA在反轉錄時用不同的螢光染料進行標記,再將兩組樣品的cDNA混合後進行雜交。對同一探針位點,在兩組不同的激發光下進行檢測,便可獲得該位點上兩個不同樣品的雜交信號,其比值經合適的統計方法進行歸一化校正後,就是該基因在兩個不同樣品中差異表達的比值。該系統可以很好地克服檢測過程中某些不穩定或不確定因素帶來的不利影響,從而吋以用於基因表達差異的研究。(侯一平)

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