反轉錄合成DNA

反轉錄(或叫逆轉錄) 合成DNA 是人工模擬自然界某些生物的反轉錄過程。自然界核糖核酸RNA 病毒不含脫氧核糖核酸(DNA),它們的繁殖方式有兩類,一種是直接以核糖核酸(RNA) 為複製模板以及轉錄模板; 另一種是先將病毒核核酸(RNA) 的遺傳信息反轉錄給脫氧核糖核酸(DNA),即在病毒的反轉錄酶(RNA 指導的DNA 聚合酶) 作用下,使宿主細胞以病毒的核糖核酸(RNA) 為模板合成脫氧核糖核酸(DNA),然後再以脫氧核糖核酸(DNA)為模板轉錄生成核糖核酸(RNA)。

在實驗室模擬RNA 病毒反轉錄方式即可合成DNA,主要用於分子量較大而又不知其序列的基因,它以目的基因的mRNA 為模板,以dNTP 為底物,酶催化按5'一3' 方向合成一條與RNA 模板互補的DNA 單鏈(complementary DNA,cDNA),它與RNA 模板形成RNA與DNA 雜交體。隨後又在反轉錄酶的作用下水解掉RNA 鏈,再以CDNA 為模板合成第二條DNA 鏈。至此,由RNA 指導的DNA 合成過程完成。

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