北京百奧賽圖基因生物技術有限公司

北京百奧賽圖基因生物技術有限公司 (Beijing Biocytogen Co.,Ltd)是由具有多年模式動物研發經驗的留學生團隊，在美國創立Biocytogen生物公司並成功運營後，於2009年11月在中關村生命科學園註冊成立的高科技生物技術企業。

基本介紹

• 公司名稱：北京百奧賽圖基因生物技術有限公司
• 外文名稱：Beijing Biocytogen
• 總部地點：北京
• 成立時間：2009年11月
• 公司性質：有限公司

公司簡介

公司的目標是為國內外客戶提供專業、快速的基因打靶模式動物開發與服務。

公司充分利用其快速整合中美兩國技術、人員、信息等優勢資源的能力，建立起由獨特的基因打靶載體構建技術、傳代穩定的C57BL/6遺傳背景的小鼠胚胎幹細胞、穩定的顯微注射系統以及標準的技術評價與檢測體系共同組成的，完整而高效的基因敲除模式動物開發與技術服務平台。公司開發擁有自主智慧財產權的模式小鼠、套用廣泛的人類疾病小鼠模型（癌症，神經退化性疾病，心血管疾病等）和細胞因子類基因嵌入報告基因模式小鼠等，以出售執照的方式提供給國內外客戶。形成了專業的定製化模式動物開發服務模式。公司國際領先的模式小鼠研發速度（7-9個月）比國外同類公司縮短近一半的時間。通過直接得到C57BL/6遺傳背景的基因敲除類模式小鼠可以為客戶省去至少兩年的回交時間（與採用常規129背景的小鼠胚胎幹細胞相比）。公司的服務可以極大地提升客戶科研能力、解決科研瓶頸，從而增強了客戶的科研競爭力。利用公司提供的模式小鼠所得到的結果已經發表在包括Immunity, JEM 等相關雜誌上。

發展簡介

2008年6月

沈月雷博士利用其將近20年的免疫學，分子生物學和基因敲除類模式動物製備和研究經驗，在美國發起成立Biocytogen生物技術公司並擔任公司總裁兼CEO。其帶領下的公司團隊已經研發出多種模式小鼠，並已經授權給全球近百家大學，研究所，和醫藥企業使用。

2009年11月

沈月雷博士又發起成立了北京百奧賽圖基因生物技術有限公司並擔任公司董事長兼首席科學家。

2011年4月

公司正式接受對外服務課題訂單。國內第一個課題訂單于2011年4月16日開始，到2011年10月30日完成課題（獲得雜合子F1代小鼠）的全部工作，所用時間不到7個月。比國外類似公司快一半的時間，極大地增加了公司在國際同行業的競爭力。到2011年12月底，公司共獲得國內外委託課題77個。預計2012年將獲得委託課題200多個。

2011年12月

公司遷址到位於北京經濟技術開發區的亦莊生物醫藥園。新址面積達2000多平米。其中包括分子生物學實驗室3個，胚胎幹細胞培養室3個，研發室一個。優越的工作環境，完善的配套設施為公司更好地為國內外客戶提供最快的基因敲除模式動物研發服務提供了良好的基礎條件。

2012年3月

百奧維達中國基金（BioVeda China）投資北京百奧賽圖基因生物技術有限公司。百奧維達中國基金（BioVeda China）是一家國際性的創業投資公司，專注於投資生命科學領域具有技術和傑出科研、管理團隊的成長型企業，百奧維達在生物技術和醫藥等領域擁有豐富投資和管理經驗。百奧維達的加入，將極大地推動公司的快速發展壯大。

產品與服務

基因敲除

1.1 基因嵌入小鼠模型

基因嵌入(knockin)是根據實驗要求，在目的基因位置引進特定的突變或外源基因。比如在目的基因上引入點突變(模擬模型人類遺傳疾病)；或將報告基因(如EGFP，mRFP，mCherry，mYFP，Thy1.1或LacZ等)通過同源重組的方式引入目的基因的特定位點，從而可以通過報告基因的表達跟蹤目標基因的表達。通過報告基因的表達可以研究基因的表達譜。也可以用報告基因取代小鼠本身的基因，使敲除/敲進同時發生。

1.2 人源化小鼠模型

人源化小鼠模型時指帶有功能性的人類基因、細胞或組織的小鼠模型。這種模型通常被用做人類疾病體內研究(in vivo study)的活體替代模型。人源化小鼠模型的套用很廣泛，比如在愛滋病、癌症、傳染病、人類退化性疾病、血液病研究領域等都有廣泛的套用。近幾年，帶有人類基因的人源化小鼠模型已經被證明在解碼人類疾病奧秘中具有巨大的優勢和廣泛的套用前景。由於人類生理與動物生理常有顯著的區別，使利用動物模型得到的實驗結果有時不能適用到人體上。比如，有些利用小鼠等動物模型開發的藥物在人體上並沒有作用。所以，利用轉基因或同源重組的方法，將人類基因“放置”在小鼠模型上所製備的人源化小鼠模型，將是進行一些人類疾病研究的有效工具。

1.3 條件性基因敲除（Conditional Knockout)

條件性基因敲除主要是通過Cre-LoxP/ FLP-frt重組系統來實現的。這兩個系統都是染色體位點特異性重組酶系統。比如在待敲除的一段目標DNA序列的兩端各放置一個loxP（或Frt）序列，得到flox（flanked by loxP)小鼠。將flox小鼠與帶有細胞特異性表達的Cre(或Flp)的小鼠交配繁殖，以獲得在特定細胞里把目標基因敲除掉的小鼠，即條件性基因敲除小鼠。其套用可以使靶基因的表達或缺失發生在實驗動物發育的某一階段或某一特定的組織器官，從而使對小鼠基因組的修飾的範圍和時間處於一種可控狀態。此外，若與控制Cre或Flp表達的其他誘導系統相結合，還可以對某一基因同時實現時空兩方面的調控。

1.4 全基因敲除小鼠 (Conventional Knockout)

全基因敲除是將目標基因用一段外源DNA序列(多數情況下是用於藥物篩選的新黴素(Neomycin)抗性基因)來取代，從而達到使目的基因失活的目的。用於conventional knockout的基因打靶質粒構建相對簡單。一般有一個陽性篩選基因（比如NeoR, Hygromycin Resistant Gene)和一個陰性篩選基因（如TK)。陽性篩選基因位於兩個同源臂的中間，陰性篩選基因一般位於一個同源臂的外側。陽性篩選基因類似於分子生物學實驗中質粒上的氨苄等抗性基因。在轉染小鼠胚胎幹細胞之前，一般要對打靶載體進行線狀化，然後利用電轉儀通過電轉的方式將打靶載體導入小鼠胚胎幹細胞內。線狀打靶載體會整合到染色體上。在抗生素（比如G418）存在的情況下，只有染色體上重組了打靶載體的胚胎幹細胞才能成活並增殖。如果是同源重組，陰性篩選基因會丟失，導致不能表達。如果是隨機插入，一般會保留同源臂外的陰性篩選基因。傳統上陰性篩選基因一般是用來自於HSV的胸苷激酶基因，這種激酶會將Gancyclovir轉變成一個核苷類似物，並在基因組複製的過程中整合到新合成的DNA鏈上，造成DNA複製停止。所以，Gancyclovir能夠抑制打靶載體隨機插入的胚胎幹細胞增殖。由於Gancyclovir經常會影響得到嵌合體小鼠後的種系傳遞，所以現在打靶載體很少再用TK基因做為陰性篩選基因了。目前最常用的是DTA(Diphtheria Toxin Subinit A, 白喉毒素A亞基）。在隨機插入的情況下，如果有DTA表達，DTA可以直接殺死細胞，不需要再通過加入Gancyclovirs的方式進行陰性篩選。

如果不知道一個基因被敲除後會不會致死，最好是做條件性基因敲除。條件性基因敲除通過跟 Cre Deletor 小鼠交配，可以獲得全敲除小鼠。而如果直接製備全敲除小鼠，一旦是致死基因，可能就需要重新開始做條件性敲除，造成時間和資金上的雙重損失。

1.5 ROSA位點轉基因小鼠

傳統的轉基因小鼠一般通過利用質粒進行受精卵原核注射的方式來製備。通常會得到多個品系（founders)。不同品系由於質粒在染色體上的整合為點不同，拷貝數不同，不同品系之間不容易得到一致的結果。由於轉基因小鼠傳代後拷貝數稀釋，以及基因沉默等原因，同一品系的表型在傳代過程中也很容易丟失，造成實驗結果不能重複。現在大部分實驗室都是通過定點轉基因的方式來製備轉基因小鼠。其中用的最多的位點是Rosa26位置。到目前為止已經報導的有200多種利用Rosa26位點研發的轉基因小鼠。

Rosa26基因敲入技術最早是由Phillipe Soriano建立並發展起來的。在原來的設計中，目的基因cDNA上游帶有一段轉錄終止序列“Stop”（3個拷貝的SV40多聚A序列，tPA）,轉錄終止序列的兩端各有一個Loxp位點，將此結構定點嵌入Rosa26基因位置，整個結構的轉錄受Rosa26啟動子控制。在沒有Cre的情況下，由於Rosa26啟動子與目的基因之間“STOP”的存在，目的基因不能被表達。如果有Cre表達， Cre重組酶將去除“STOP”，Rosa26啟動子就可以啟動目的基因表達。大量研究證實，Rosa26基因幾乎在所有組織中都能編碼一種非必需的核RNA，且為外源基因的插入熱點。而Rosa26位點基因嵌入技術可以非常有效地建立多用途的條件性轉基因小鼠模型，所以越來越受到科學家的青睞。但是，由於Rosa26啟動子在某些組織中的啟動能力有限，目的基因經常達不到研究人員需要的表達水平。為了解決這一問題，可以對原Rosa26基因敲入系統做改進，引入了一個強效的啟動子，如CAG啟動子, 該啟動子由雞actin啟動子和CMV增強子融合而成，用這一雜合啟動子代替Rosa26啟動子，從而高效地啟動目的基因表達。

模型鼠使用執照

1.免疫類小鼠模型

1.1 IL17- GFP knockin mice

1.2 IL23- GFP knockin mice

1.3 IL25- GFP knockin mice

2 .疾病類小鼠模型

2.1 p53 knockout mice

2.2 ApoE knockout mice

3 工具類小鼠模型

3.1 pCAG-STOP-DTR-2A-EGFP mice

小鼠表型分析

本服務的目的是為課題提供系統而全面的基因敲除模式小鼠表型分析。每一個基因敲除模式小鼠的研發都是一項資金投入較大的項目。科研人員由於有自己的專業關注點或實驗人員資源有限，經常只是對模式小鼠做部分分析。而一個基因往往在多種不同組織或細胞中發揮著重要功能。 所以有必要對所得到的基因敲除模式小鼠進行全面而系統的表型分析，從而給出一個完整的實驗數據。

表型分析平台將幫助客戶認識其所研究基因的新功能，增加客戶的科研競爭力。新表型的發現將有助於找到與人類疾病相關的小鼠基因，以建立人類重要疾病動物模型，並為進行人類疾病治療研究做出貢獻。

百奧賽圖公司的表型分析團隊由來自於不同領域具有博士和碩士學的科研人員組成。表型分析平台將篩選包括代謝，免疫（免疫系統和細胞分析），神經生物學，胚胎與器官發育，心血管，哮喘，EAE, 類風濕性關節炎，感染，畸形，癌變，行為與認知等多個方面，以期找到未知的新表型。

課題合作

由於生命科學研究的發展非常迅速，而單個實驗室的知識和資源有限，優勢互補的合作可以加快科學研究的步伐。百奧賽圖公司願意在下列模型(包括而不限於)的研發中與客戶合作：自身免疫、癌症、神經疾病、傳染病、血液病等人類疾病的小鼠模型的開發，以及一些對基礎科學研究有重要作用的小鼠模型的研發。

企業文化

平等：“員工人格上的平等”是我們公司企業文化的根本。公司倡導“視人才為企業的第一資源，堅持以人為本，共同成長的社會責任準則。公司善待員工，切實維護員工的根本利益，充分尊重員工的價值和願望，保證員工與企業共同發展”的企業理念。

責任：公司強調人員素質，建立企業文化，責任首當其衝。我們公司企業文化中確立了四大責任——對客戶的責任、對員工的責任、對投資人的責任和對社會的責任。公司一直秉承這個宗旨不斷努力。

團結：團隊精神是企業文化建設的一個重要內容。公司員工大團結，是實現公司進步的根本保證。團結是重要的，只有全體員工團結一心，才能表現企業的凝聚力；只要有了凝聚力，企業才有生命。

創新：是企業生命力的源頭，因此，她作為企業核心能力的一部份貫穿在企業文化的主題中。我們公司提出了四個方面的創新：產品創新、技術創新、市場創新、管理創新。

核心團隊

百奧賽圖公司擁有一支國際頂級的專家顧問團隊，包括Dan Littman 博士（美國科學院院士，紐約大學醫學院教授），Kenneth Rock 博士（美國麻省大學醫學院教授，病理系主任），Vijay Kuchroo 博士 (哈佛大學醫學院教授)，Chingwen Yang 博士（Rockefeller University實驗動物中心主任）和高紹榮博士（北京生命科學研究所）等。他們為公司的科研工作提供的專業指導和建議，使公司所研發的模式動物滿足及服務於最前沿科學研究。

沈月雷博士：公司董事長兼首席科學家

1992年本科畢業於武漢大學病毒學及分子生物學系，並考入中國藥品生物製品檢定所攻讀碩士學位。期間主要從事人巨細胞病毒感染早期診斷試劑盒的研製和病毒類疫苗的質檢工作。1997年赴美，於2003年在美國University of Massachusetts School of Medicine 獲博士學位後，赴 New York University School of Medicine/Howard Hughes Medical Institute 的Dan Littman教授實驗室進行博士後研究（2003—2008）。主要是從事利用模式小鼠模型進行自身免疫性疾病致病機理的基礎研究。2008年6月在美國麻薩諸塞州發起成立Biocytogen生物技術公司。帶領團隊研發出多個基因剔除，基因嵌入模式小鼠品系。這些品系正被全球上百個實驗室套用。其成果也在包括Nature, Nature Immunology, Immunity 等頂尖雜誌上發表。沈月雷博士具有將近20年的免疫學，分子生物學，和基因剔除類模式動物製備和研究經驗。2009年11月，沈月雷博士又發起成立了北京百奧賽圖基因生物技術有限公司並擔任公司的首席科學家。沈月雷博士於2011年4月獲選北京市第四批“海聚工程”人才。

Eugene Anton博士：百奧賽圖美國公司（Biocytogen）首席運行官（COO)

分別獲得St. Thomas University工商管理碩士學位和Pepperdine University博士學位。具有25年的公司管理，財務管理和市場運作經驗。加入Biocytogen公司之前，Anton博士曾任洛杉磯市政府財務顧問，風險投資公司副總裁，投資顧問公司合伙人，以及石油天然氣投資公司財務總監等職務。Anton博士曾任多個商業及經濟發展委員會主席，包括Santa Ana Federal Empowerment Corporation, The LongBeach Shipyard Reuse Task Force, 和the Long Beach Economic Development Commission。目前，Anton博士主要負責Biocytogen公司的法律檔案，客戶關係，行政管理等。

金天權博士：百奧賽圖美國公司（Biocytogen）市場及產品部總監

1992年，本科畢業於武漢大學病毒學和分子生物學系；1997年，獲得武漢大學病毒學博士學位。1998赴美，於科羅拉多州立大學進行博士後研究；1999年轉到伊利諾伊大學芝加哥分校進行博士後研究。2002到2010年，任伊利諾伊大學芝加哥分校研究助理教授。其研究成果在包括JBC, Cancer Research, PLoS Bio等國際刊物上發表。2010年9月至2011年11月，在位於美國麻薩諸塞州的Advanced Cell Technology （ACT）公司從事人胚胎幹細胞研究。2011年11月加入Biocytogen (北京百奧賽圖基因生物技術有限公司位於美國的全資子公司），並任美國Biocytogen公司市場及產品部總監。

王靖碩士：小鼠基因敲除技術培訓總監。

1990年碩士畢業於安徽大學。1990年至1997年於安徽大學現代分析技術中心任職；1998年赴日本，於日本筑波市國立生物科學與技術研究所分子生物學系任Research Assistant；2001年赴美，於美國伊利諾伊大學Urbana-Champaign分校生物化學系任職Research Specialist; 2006年至2010年於哈佛大學醫學院Klaus Rajewsky 實驗室任職Research Assistant, 主要從事基因敲除模式小鼠的研發製備，其工作成果發表在包括<Cell>在內的多種國際期刊上。憑藉其豐富的胚胎幹細胞分離、培養和篩選的工作經驗，於2010年3月加入北京百奧賽圖基因生物技術有限公司，任小鼠基因敲除技術培訓總監。

合作單位

中國:

中科院動物研究所；中科院遺傳與發育研究所；中科院神經研究所；中科院細胞與生物化學研究所；中科院生物物理所；北京大學；中國醫學科學院基礎醫學研究所；浙江大學；北京生命科學研究所；河北醫科大學；GSK上海；白鷺醫藥；等等。

國外：

Harvard Medical School (Beth Israel Medical Center; Dana Farber Cancer Institute; Brigham and Women’s Hospital; Mass General Hospital; Children’s Hospital), USA; JohnHopkins University School of Medicine, USA; Univ.of Penn School of Medicine, USA; Univ of Pitts School of Medicine, USA; Univ. of South California School of Medicine, USA; Univ.of Cincinnati School of Medicine, USA; Boston University, USA; Univ.Hospital of Ulm，Germany; Theracos Company, USA; Univ.of Amsterdam Netherland; Temple Univ. School of Medicine, USA; Univ.of Florida School of Medicine, USA; Univ of Michigan School of Medicine, USA; National Institute of Health, USA; Mount Sinai School of Medicine, USA; National Institutefor Medical Research, UK; Roche, USA; Merck, USA; Johnson & Johnson, USA; et al.