國家食品藥品監督管理局出台的《化妝品中過氧化氫的檢測方法》中的方法。
拼音,適用範圍,方法提要,試劑和溶液,儀器和設備,分析步驟,結果計算,回收率與精密度,
拼音
huàzhuāngpǐnzhōngguòyǎnghuàqīngdejiǎncèfāngfǎ
《化妝品中過氧化氫的檢測方法》由國家食品藥品監督管理局於2012年1月18日國食藥監保化[2012]13號發布。
適用範圍
本方法規定了採用高效液相色譜法測定化妝品中過氧化氫（CAS：7722-84-1）含量的方法。
本方法適用於染髮劑、膏狀面膜中過氧化氫含量的測定。
方法提要
試樣採用水浸提，部分上清液與三苯基膦衍生反應，衍生溶液經濾膜過濾，用液相色譜分離，紫外檢測器檢測，峰面積定量，以標準曲線法計算含量，得到樣品中過氧化氫的含量。本方法對過氧化氫的檢出限為0.0012μg，定量下限為0.004μg。若取0.2g樣品，過氧化氫的最低檢出濃度為60μg/g，最低定量濃度為200μg/g。
試劑和溶液
除非另有說明，所用試劑均為分析純，水為一級實驗用水。
3.1乙腈，色譜純。
3.2三苯基膦溶液，稱取三苯基膦1.3g，用乙腈（3.1）溶解，定容至25mL，濃度為0.2mol/L，現用現配。
3.3氧化三苯基膦溶液，稱取氧化三苯基膦0.0003g，用乙腈（3.1）溶解，定容至100mL，濃度為0.00001mol/L。
3.4過氧化氫，濃度為3%，使用前需要進行標定，標定方法見附錄。
3.5過氧化氫標準儲備液：稱取標定過的過氧化氫對照品（3.4）1.5g，精確到0.0001g，置於25mL棕色容量瓶中，用水定容，搖勻，配製成質量濃度為1.8mg/mL的標準儲備溶液。
3.6過氧化氫標準工作液：配製濃度分別為3.6mg/L、9.0mg/L、18mg/L、36mg/L、54mg/L、90mg/L、180mg/L的標準工作液。
儀器和設備
4.1高效液相色譜儀：具有二極體陣列檢測器。
4.2渦旋振盪器。
4.3分析天平：感量0.0001g。
4.4分析天平：感量0.001g。
分析步驟
5.1樣液的製備
5.1.1樣品前處理
稱取樣品約0.05g～0.2g（精確至0.001g），含過氧化氫3%以下稱取0.2g，含過氧化氫3%～6%稱取0.1g，含過氧化氫6%～12%稱取0.05g，置於100mL容量瓶中，加入約50mL水，振搖至樣品完全溶解，用水定容，搖勻備用。面膜等半固體樣品可以稱取樣品於50mL燒杯，加入約20mL，用玻璃棒將樣品攪碎，用水轉移至100mL容量瓶中，定容，搖勻備用。
5.1.2衍生化反應
分別移取過氧化氫標準工作液（3.6）和樣液（5.1.1）各1mL於10mL棕色容量瓶中，加入1mL三苯基膦乙腈溶液（3.2），振搖，繼續加入5mL乙腈（3.1），振搖，用水定容，搖勻。置於暗處室溫反應30min。
5.2測定
5.2.1色譜參考條件
色譜柱：C18色譜柱，4.6mm×250mm，5mm；
流動相：乙腈+水（60+40）（體積比）；
流速：1.0mL/min；
檢測波長：225nm；
進樣量：10uL。
5.2.2標準曲線的繪製
吸取10uL氧化三苯基膦溶液（3.3），注入高效液相色譜儀，確定氧化三苯基膦的保留時間。衍生化反應結束後，立即開始色譜分析，分別吸取10mL過氧化氫標準工作液衍生液（5.1.2）注入高效液相色譜儀，2h內完成上機分析。在上述色譜條件下測定其峰面積，記錄氧化三苯基膦的峰面積，以標準溶液濃度為橫坐標、氧化三苯基膦的峰面積為縱坐標，繪製標準工作曲線。
5.2.3樣品中過氧化氫的測定
衍生化反應結束後，立即開始色譜分析，吸取10mL樣液（5.1.2）注入高效液相色譜儀，2h內完成上機分析。在上述色譜條件下測定其峰面積。利用回歸方程式計算樣液中過氧化氫的濃度。
5.3平行實驗
按以上步驟操作，對同一樣品獨立進行測定獲得的兩次獨立測試結果的絕對差值不得超過算術平均值的10%。
結果計算
式中：w——化妝品中過氧化氫的含量，%；
r——由回歸方程式計算待測樣液（5.1.3）中過氧化氫的質量濃度，mg/L；
V——樣品定容體積，mL；
D——樣品稀釋倍數；
m——樣品取樣量，g。
回收率與精密度
方法的回收率為99.9%～107.3%，相對標準偏差小於7%（n=6）。
