介紹
大量研究表明:在性關係混亂的人群中,
加德納菌性陰道炎有高流行率。與患者發生性關係的男性伴侶中,90%的尿道中可發現此菌。
加德納桿菌為革蘭氏陰性細小桿菌,常呈球桿狀,有時呈絲狀和多形狀,常見兩極染色。僅0.4--0.6毫微米至1--2毫微米大小,無活動力、無
鞭毛、無芽孢。許多菌株有
莢膜。在人工培養時必須給予新鮮血液才能生長繁殖,故有“嗜血”之稱。但其生物特性與嗜血桿菌不盡相同,臨床上引起的陰道炎為
非特異性陰道炎。
症狀
加德納桿菌引起的感染多數較輕,多見於性活躍婦女。急性期白帶增多,有魚腥或氨的臭味,外陰潮濕不適,常伴有陰道灼熱感、性交痛及外陰騷癢。檢查見部分患者外陰紅腫,陰道黏膜充血,呈灰紅色,輕度紅腫,分泌物多呈均質性,稀薄,灰白色,有時為乳黃色或類綠色,腥臭味。陰道pH常為5--5.5。有時白帶量少,僅有薄薄一層,如膜樣覆蓋在充血的陰道壁上。少數患者陰道壁有紅斑或淤點,孕婦患者可引起流產或產後子宮內膜炎。感染重者也可導致敗血症、尿道感染、腎周膿腫和膀胱炎等。
根據臨床表現,陰道分泌物塗片或培養確診。尤其能查到特徵性
線索細胞,診斷不難。
檢驗方法
材料和方法
1、臨床標本:宮頸分泌物,取自醫院門診婦產科就診的
非特異性陰道炎(NSV)患者,常規消毒用無菌棉簽自宮頸口取分泌物於無菌生理鹽水管中。
2、
革蘭染色法:取無菌生理鹽水中的宮頸或陰道分泌物直接塗片,常規革蘭染色,找到
線索細胞者為陽性。
3、
吖啶橙染色螢光法:取無菌生理鹽水中的宮頸或陰道分泌物直接塗片,
自然乾燥,火焰固定,0.1 mmol/L吖啶橙染色37℃30 min,用0.01 mol/L PBS沖洗2次,0.01 mmol/L
氯化鈣分色1 min,用0.01 mol/L PBS緩衝液沖洗1次,甘油封片,螢光顯微鏡觀察結果。在
上皮細胞中發現成堆桔黃色細小桿菌為陽性。
5、
PCR檢測法:(1)根據Belkum等報導
加德納菌位於IIS-23srRNA基因區為特異性
引物序列,擴增片段:433bp。
引物15′-TTTCGTGGAGGGTTCGATTCTGG-3′引物2 5′-TACA-AGCTGATAGGACGCG-3′由
上海生物工程公司合成。(2)臨床標本模板DNA的製備:將宮頸分泌物500μl生理鹽水中,12 000 r/min離心10 min,棄
上清液,加鹼性裂解液,98℃10 min,12 000 r/min離心5 min,取上清液做模板。(3)PCR擴增和產物檢測:反應總體積為25μl,包括10×PCR緩衝液2.5 μl,4×dNTP 1.5 μl,
引物1,2各0.25 μl,無菌去離子水9.5μl,模板10 μl,Taq
DNA聚合酶1 U/μl,以無菌石蠟油30 μl覆蓋,進入PCR循環,循環參數為:95℃5 min,94℃ 1 min,58℃ 1 min,72℃ 1 min,32個循環,最後72℃延伸5 min。取擴增產物15 μl,於2%瓊脂糖(含EB液)上100 V電泳30 min,於
紫外光下觀察結果,出現433 bp擴增帶者為陽性,未見433 bp擴增帶為陰性。
討論
2、
吖啶橙染色
免疫螢光檢測法是近年來一種新的較為理想的檢測手段,由於吖啶橙是一種具有
異染性染料,吖啶橙以插入方式與病原體雙螺旋DNA分子結合,根據病原體DNA或RNA對吖啶橙染料的吸附方式不同所放射的螢光也不同,再加上
加德納菌在侵襲的靶目標為
上皮細胞聚集,當吖啶橙染色後在螢光照射下,發射出桔紅色螢光,能清晰地檢測出加德納菌在上皮細胞上的聚集現象,作出精確的診斷。
3、分離培養鑑定法是國際確認的金指標,臨床上由於不正規的套用抗生素,導致許多病原體在一定程度上受到抑制,給分離培養帶來困難,造成分離培養陰性結果,建議做分離培養應取材於治療前的標本,需要專用的高營養的培養基,以提高分離培養的陽性檢出率。
4、PCR技術具有高度的特異性和
敏感性,選用特異的寡核苷酸
引物序列,檢測目的是病原體的遺傳物質DNA不受抗生素治療等藥物治療的影響,對徹底根治病原體有著極其重要的意義。
一般治療
1)磺胺類藥物和四環素族藥物
將四環素100毫克和
磺胺噻唑0.5克製成栓劑,置入陰道深部,每晚一次,共10日。
2)滅滴靈
每次250毫克,1日3次,共7日。或大劑量2克,一次口服。大劑量可能引起噁心、嘔吐。
3)氨苄青黴素
口服500毫克,一天4次,共7日。有全身感染者,可靜脈滴注氨苄青黴素或氯黴素。
4)治療期間禁止性生活
因為男性伴侶常是無症狀帶菌者,其尿培養陽性率高達79.91%,雙方應同時治療。