分級洗脫是利用包括特定濃度鈣離子的洗脫緩衝液通過分級洗脫從陰離子交換材料中根據所需糖型從批量凝血因子VII多肽中純化凝血因子VII多肽。本發明使得能夠根據所需糖型來富集批量凝血因子VII多肽。
分級洗脫是利用包括特定濃度鈣離子的洗脫緩衝液通過分級洗脫從陰離子交換材料中根據所需糖型從批量凝血因子VII多肽中純化凝血因子VII多肽。本發明使得能夠根據所需糖型來富集批量凝血因子VII多肽。
1.一種用於純化批量凝血因子VII多肽的工業規模方法，所述方法包括下列步驟：
(a)在有利於所述批量凝血因子VII多肽的一部分與陰離子交換材料結合的條件下，使所述批量凝血因子VII多肽與所述陰離子交換材料接觸；(b)用包括濃度至多閾值XmM的Ca2+的第一種洗脫緩衝液洗脫所述陰離子交換材料；(c)用包括濃度超過閾值XmM的Ca2+的第二種洗脫緩衝液洗脫所述陰離子交換材料，並收集作為洗出液的純化的批量凝血因子VII多肽；其中選擇所述閾值X從而使得在第一個洗脫步驟(b)中從所述陰離子交換材料中去除至少5wt%的批量凝血因子VII多肽，並且在所述第二個洗脫步驟(c)中可以收集至少50wt%的批量凝血因子VII多肽作為純化的批量凝血因子VII多肽。
