分子雜交反應

核酸分子雜交反應時間,在條件都得到滿足的情況下,雜交的成敗就取決於保溫時間。時間短了,雜交反應不完成;時間長了也無益,會引起非特異結合增多。一般雜交反應要進行20h左右。1966年Britten和Kohne推薦用Cot =值來計算雜交反應時間。Cot 值實際上是雜交液中單鏈起始濃度(Co)和反應時間(t)的乘積。

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簡介

實驗表明Cot =100時,雜交反應基本完成。Cot=0,基本上沒有 雜交。例如在液相雜交中未標記的DNa 400μg/ml(按單股DNA每微克 紫外吸收值為0.024計算,總的吸收值為9.6),如果反應時間為21h,那么對於未標記的DNA來說,Cot =9.6/21 =100.8, 雜交完成了。對標記Dn A(濃度為0.1μg/ml)來說Cot值為0.05,這就充分排除了標記DNA的自我復性。

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1339C型 分子雜交儀(酶聯反應孵育器)
該儀器依據核酸分子雜交技術原理,採用智慧型型數字溫度控制器,可作分子雜交,也可作酶聯反應孵育器。與酶免結合可建立全定量或半定量PCR檢測方法。在病毒、細菌疾病的基因診斷的臨床檢測中具有良好的套用效果。
主要特點:
儀器結構採用模組化設計,外觀新穎,溫度控制穩定,操作簡單可靠,轉速穩定,不受外界電源電壓影響。
主要技術指標:
◆ 恆溫範圍:室溫+5~100℃;
◆ 控溫精度:±1℃;
◆ 溫度均勻性誤差:±0.03;
◆ 溫度平衡時間:<20min;
◆ 溫度顯示分辯率:0.1℃;
◆旋轉速度:5-20r/min;(數顯連續可調)
◆ 連續工作時間:24h;
◆ 電源電壓:AC220V, 50Hz;
◆ 功率:<600VA;
◆ 雜交管規格:mm,Ф35×200。

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