凝膠層析又稱凝膠過濾，是一種按分子量大小分離物質的層析方法。該方法是把樣品加到充滿著凝膠顆粒的層析柱中，然後用緩衝液洗脫。大分子不能進入凝膠顆粒中的靜止相中，只留在凝膠顆粒之間的流動相中，因此以較快的速度首先流出層析柱，而小分子則能自由出入凝膠顆粒中，並很快在流動相和靜止相之間形成動態平衡，因此就要花費較長的時間流經柱床，從而使不同大小的分子得以分離。
概述,分類,
概述
凝膠層析又稱凝膠過濾，是一種按分子量大小分離物質的層析方法。該方法是把樣品加到充滿著凝膠顆粒的層析柱中，然後用緩衝液洗脫。大分子不能進入凝膠顆粒中的靜止相中，只留在凝膠顆粒之間的流動相中，因此以較快的速度首先流出層析柱，而小分子則能自由出入凝膠顆粒中，並很快在流動相和靜止相之間形成動態平衡，因此就要花費較長的時間流經柱床，從而使不同大小的分子得以分離。
分類
商品凝膠的種類很多，常用的有葡聚糖凝膠（Sephadex G）以及羥丙基葡聚糖凝膠(Sephadex LH-20)。
（1）葡聚糖凝膠：有平均分子量一定的葡聚糖及交聯劑（如環氧氯丙烷）交聯聚合而成。生成的凝膠顆粒網孔大小取決於所用交聯劑的數量及反應條件。加入的交聯劑數量越多即交聯度越高，網孔越緊密，孔徑越小，吸水膨脹也越小；交聯度低，則網孔越稀疏，吸水後膨脹也越大。商品型號即按交聯度大小分類，並以吸水量多少表示。以Sephadex G-25為例，G為凝膠，後附數字=吸水量*10，故G-25表示該葡聚糖凝膠吸水量為2.5ml/g。此型號凝膠只適用於在水中套用，且不同規格適合分離不同分子量的物質。
（2）羥丙基葡聚糖凝膠：為Sephadex G-25經羥丙基化處理後得到的產物。與葡聚糖凝膠相比，雖然羥基的數目沒有改變，但碳原子所占比例相對增加，因此此類型凝膠不僅可在水中套用，也可在極性有機溶劑或它們與水組成的混合溶劑中膨潤使用。此類型除保留有葡聚糖凝膠的分子篩特性，可按分子量大小分離物質外，在由極性與非極性溶劑組成的混合溶劑中還可起到反相分配色譜的作用。
羥丙基葡聚糖凝膠可再生，暫時不用時可用水洗、含水醇洗、醇洗，最後泡在醇中貯於磨口瓶中備用。
此外，商品凝膠還有丙烯醯胺凝膠、瓊脂糖凝膠以及結合了不同離子交換基團的葡聚糖凝膠衍生物。
