冰凍顯微免疫標記技術

冰凍顯微免疫標記技術

《冰凍顯微免疫標記技術》是2007年化學工業出版社出版的圖書,作者是黃炳權。

基本介紹

  • 書名:冰凍顯微免疫標記技術
  • 作者:黃炳權
  • ISBN:9787122010773
  • 頁數:236 頁
  • 出版社:化學工業出版社
  • 出版時間:2007年10月
  • 裝幀:平裝
  • 開本:16開
內容簡介
本書共11章,系統地介紹了生物樣品的冰凍處理、快速冰凍固定方法和免疫細胞化學技術。除介紹當前在分子生物學上廣泛使用的各種冰凍免疫顯微標記技術外,還重點介紹了近年來發展的超薄冰凍切片、高壓冰凍固定、光學和電子顯微鏡對應定位和冰凍負染色等新技術。書中在講述方法的同時,簡述技術原理,並通過圖表和實例解釋技術要點,還針對實驗中易出現的問題提出了解決辦法。
本書可作為大學生和研究生的參考教材,並可作為從事生物、醫藥、醫學研究和臨床診斷相關教學和研究人員的參考書。
目錄
第1章冰凍顯微免疫細胞化學的發展和套用1
11歷史簡述和技術發展1
12標記方法的選擇3
13顯微免疫細胞化學在分子生物學和醫學研究的套用7
131在細胞分子生物學中的套用7
132在病理學和腫瘤診斷中的套用9
第2章冰凍切片和光學顯微鏡的免疫細胞化學12
21免疫標記的基本原理12
211抗體的種類12
212抗體的結構13
213抗原定位標記物13
214抗體的標記方式17
215抗體對不同抗原的雙重或多重標記20
22抗體特異性測定和實驗對照20
221測定新的第一抗體20
222抗體所引起的非特異性染色21
223防止非特異性標記的方法21
23生物樣品的處理和冰凍切片22
231大組織塊的冰凍切片方法22
232冰凍半薄切片方法25
24免疫螢光標記30
241抗體和標記方法的選擇30
242螢光染料的特性和選擇31
243雙重或多重螢光標記33
244標記的步驟33
25免疫過氧化物酶顯色標記34
251抗生物素蛋白生物素方法35
252快速臨床免疫組織化學染色方法38
26免疫標記出現問題的處理39
27免疫標記實例42
271老鼠膽管纖毛的冰凍半薄切片螢光標記42
272用螢光和冰凍超薄切片對人胎盤抗原定位43
273快速免疫組織化學染色44
第3章冰凍超薄切片和電子顯微鏡的免疫金標記46
31引言46
32設備和試劑的準備47
321冰凍切片機47
322切片刀47
323支持膜製作和碳覆蓋48
324免疫金粒標記物的製備49
33生物樣品的固定和處理方法54
331固定劑54
332其他影響固定質量的條件55
333固定程式56
334樣品包埋處理58
335蔗糖冰凍保護59
336樣品的安放和冰凍59
34冰凍超薄切片60
341樣品的初修整和半薄切片60
342樣品塊的細修整61
343冰凍超薄切片61
344切片的收集62
345冰凍切片的保存62
35免疫標記63
351標記方法和程式63
352蛋白A法64
353IgG法67
36圖像的分析和問題處理67
37套用實例71
371蛋白A標記的套用例子71
372IgG方法的套用例子71
第4章快速冰凍固定方法72
41引言72
42冰凍固定的原理73
43冰凍保護劑76
431滲透性冰凍保護劑77
432非滲透性冰凍保護劑77
44冰凍固定的主要方法78
441插入式冰凍方法79
442冷金屬塊撞擊式冰凍固定85
443丙烷噴射冰凍固定89
444噴灑式冰凍固定92
445高壓冰凍固定95
第5章高壓冰凍固定98
51高壓冰凍固定的基本原理98
52樣品處理和裝放的關鍵步驟100
521樣品載體100
522載體內細胞和組織的填充劑103
523冰凍保護劑104
524樣品的裝放104
53冰凍樣品的處理109
54常規化學固定和高壓冰凍固定效果的比較111
541化學固定和高壓冰凍固定的比較111
542高壓冰凍固定的局限性113
55冰凍固定過程中出現的問題和解決方法114
551高壓冰凍固定的注意事項114
552冰凍固定過程中出現的問題和解決方法114
第6章冰凍置換116
61概述116
62冰凍置換的條件118
621冰凍置換的溫度和材料的準備118
622冰凍置換的有機溶劑的選擇和評估119
623冰凍置換裝置120
63冰凍置換方法121
631加入固定劑的冰凍置換121
632免疫標記的冰凍置換123
633冰凍置換的各種使用方法124
第7章低溫包埋和免疫標記129
71漸進低溫脫水和丙烯樹脂包埋129
711溫度調整的方法和脫水溶劑129
712丙烯樹脂的特點和Lowicryl的配方130
713漸進低溫脫水方法131
714低溫滲透132
715低溫包埋134
716樹脂聚合134
717Lowicryl樹脂包埋塊的切片136
72LR White和LR Gold樹脂包埋137
721LR White樹脂的準備和包埋137
722LR Gold樹脂的包埋139
73免疫標記141
731免疫標記的準備和應注意的問題141
732丙烯酸樹脂切片的免疫標記步驟141
733後包埋免疫標記法142
74免疫標記信號增強法144
741納米金銀染信號增強法144
742膠體金/抗生物素法145
743生物素抗生物素金技術147
744生物素化酪胺和納米金銀染法148
75免疫標記中可能遇到的問題和處理方法149
76套用實例151
761動物單層細胞的後包埋免疫標記151
762植物細胞的低溫包埋和免疫標記152
763大鼠胰腺和肝組織的免疫電鏡標記——生物素酪胺增強法153
第8章前包埋免疫電鏡技術156
81細胞和組織標記前的處理156
82抗體標記157
83前包埋免疫標記套用實例160
831過氧化物酶標記單層培養細胞抗原160
832納米金前包埋免疫電鏡161
833前包埋納米金銀染和酪胺擴增法162
84前包埋免疫雙標記163
第9章螢光顯微鏡和免疫電鏡的對應定位技術166
91概述166
92突變細胞螢光活體和超微結構對應定位技術167
921活體突變細胞定位168
922電鏡樣品的處理和細胞定位169
93螢光納米金在螢光和免疫金標記的對應定位171
931螢光納米金探針的結構和特性172
932螢光納米金標記方法173
94冰凍超薄切片的對應免疫螢光光鏡和電鏡174
95量子點的光電鏡對應定位177
951量子點作為免疫細胞學標記物的主要特點177
952量子點標記套用實例178
96螢光蛋白的對應光電鏡定位179
961細胞螢光蛋白表達的光電鏡對應標記方法180
962綠螢光蛋白光氧化的對應螢光和電鏡方法183
第10章冰凍斷裂復型的免疫電鏡185
101概述185
102冰凍斷裂和刻蝕189
1021樣品的準備189
1022冰凍保護——甘油滲透方法192
1023冷凍處理192
1024冰凍斷裂193
1025冰凍刻蝕194
1026復型195
1027復型膜的收集和清理196
103復型膜面的免疫標記197
1031常規的標記步驟197
1032冰凍、斷裂和復型前標記197
1033冰凍斷裂後標記200
1034斷裂和復型後的標記202
1035復型標記切片和復型標記整體裝放204
104套用實例206
1041用SDS消化冰凍斷裂復型和細胞化學標記膜間蛋白——
免疫金標記胞間連線複合物206
1042用SDS消化冰凍斷裂復型標記螺旋菌壁黏附素的新方法208
第11章負染色和免疫金標記技術209
111概述209
112負染色技術211
1121負染色的材料和準備211
1122負染色方法213
113負染色免疫電鏡方法214
1131負染色免疫電鏡常規步驟214
1132負染色免疫電鏡套用實例216
114冰凍負染色方法217
1141材料準備217
1142非染色冰凍樣品的製作步驟220
1143薄膜玻璃化負染色樣品的製作221
115負染色需要注意的問題223
附錄Ⅰ225
附錄Ⅱ部分冰凍固定、免疫標記和抗體製作技術網址228
參考文獻230

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