共價結合法

共價結合法是利用酶蛋白中的氨基，羧基或酪氨酸和組氨酸中的芳香環與載體上的某些有機基團形成共價鍵，使酶固定在載體上。一般需預先用化學方法使載體獲得反應基團而活化，然後再與酶分子中的相應基團偶聯。該法優點是酶與載體結合較牢固，酶不易脫落。但是，該法製備方法複雜，條件苛刻，且易引起酶的失活。

酶或細胞經過固定化後成為固定化酶或固定化細胞，由於受到載體等因素的影響，酶的催化活性將可能發生變化，這種變化是十分複雜的。