免疫親和色譜

生物學名詞，指免疫親和色譜是指利用抗體或者與抗體相關的材料作為固定相的色譜。

基本信息

抗體對抗原性物質的選擇結合，使該技術越來越多地套用於生物物質以及非生物物質的分離、純化和分析。與HPLC結合的免疫親和和色譜稱為高效免疫親和色譜。

測定方法

免疫親和色譜的一般測定方法是將待測樣品通過色譜柱，其中待測抗原以及類似物與固定的抗體結合，其他樣品基質由於不與固定相結合而被除去。這樣，結合的待測物質被洗脫以後利用線上或非線上的方法直接測定。測定方法一般採用紫外-可見吸收光譜法和螢光光譜法等。與傳統的免疫分析相比，該技術具有操作簡單、分析快速、精密度高且可以實現自動分析等的優點。但是，採用該方法時需要選擇合適的抗體固定方式，也就是說在洗脫待測抗原時應保證固定的抗體不被解離下來。一般來講，如果用蛋白A或蛋白G作為抗體支持擔體，由於抗體與它們之間是通過弱的吸附作用相結合，因此這種固定方式的抗體在待測物洗脫或柱子再生時容易流失。比較好的抗體固定方法是通過共價結合的方式將抗體與支持擔體連線，或首先將蛋白A或蛋白G固定化，然後通過交聯的方法將抗體共價結合到蛋白A或蛋白G上，另外一種常用方法是將生物素化的抗體與固定的親和素結合。