中和試驗

中和試驗是病毒或毒素與相應的抗體結合後,失去對易感動物的致病力的試驗方法。

基本介紹

  • 名稱:中和試驗
  • 所屬分類:免疫學
正常值,臨床意義,注意事項,檢查過程,相關疾病,相關症狀,

正常值

人體處於動態平衡、健康狀態。

臨床意義

本試驗主要用於:①從待檢血清中檢出抗體,或從病料中檢出病毒,從而診斷病毒性傳染病;②用抗毒素血清檢查材料中的毒素或鑑定細菌的毒素類型;③測定抗病毒血清或抗毒素效價;④新分離病毒的鑑定和分型,中和試驗不僅可在易感的實驗動物體內進行,亦可在細胞培養上或雞胚上進行。試驗方法主要有簡單定性試驗、固定血清稀釋病毒法、固定病毒稀釋血清法、空斑減少法等。

注意事項

不合宜人群: 沒有。  檢查前禁忌:注意正常的生活飲食習慣,注意個人衛生。  檢查時要求:積極配合醫生。

檢查過程

(一)簡單定性中和試驗  本法主要用於檢出病料中的病毒,亦可進行初步鑑定或定型。先根據病毒易感性選定試驗動物(或雞胚、細胞培養)及接種途徑。將病料研磨,並稀釋成一定濃度(約100 LD50-1 000LD50或TCID50)。污染的病料需加抗生素(青黴素、鏈黴素各200-1 000單位),或用細菌濾器過濾,與已知的抗血清(適當稀釋或不稀釋)等量混合,並用正常血清加稀釋病料作對照。混合後置37℃1h,分別接種實驗動物,每組至少3隻。分別隔離飼喂,觀察發病和死亡情況。對照動物死亡,而中和組動物不死,即證實該病料中含有與該抗血清相應的病毒。本法亦可用於毒素(如毒毒素)的鑑定和分型。  (二)固定血清稀釋病毒法  本法多將病毒作10倍遞增稀釋,分置2列試管,第一列加正常血清(對照組),第二列加待檢血清(試驗組)。混合後,置37℃作用1h,將各管混合液分別接種選定的試驗動物,每一稀釋度用3-5隻動物。接種後,逐日觀察,並記錄其死亡數,觀察結束後,計算LD50和中和指數(表7-1、表7-2),本法適用於大量檢樣的檢測。  本法多用以檢出待檢血清中的中和抗體,對病毒而言,通常中和指數大於50者判為陽性,10-49為可疑,小於10為陰性。  (三)固定病毒稀釋血清法  本法用以測定抗病毒血清的中和價,將待檢血清2倍遞增稀釋,加等量已知毒價的病毒液(與血清混合後,每一接種劑量含病毒100LD50),搖勻後,置37℃作用1h,接種實驗動物。  註:[1] 接種劑量0.1ml,含病毒100LD50;  [2] 系指與病毒混合後的稀釋度;  [3] 分母為接種數,分子為保護數;  [4] PD50為半數保護,其計算法同LD50的計算。  (四)空斑減少法  在細胞培養上進行病毒中和試驗,近年來多採用空斑減少法。先將病毒稀釋成適當濃度,使每0.2ml含80個-100個PFU(空斑形成單位),與不同稀釋度的待檢血清等量混合,置37℃作用1h-2h,分別測定PFU,使空斑減少50%血清稀釋度即為該血清的中和價。見表7-4。  表7-4 空斑減少法中和試驗示例  註:[1] 血清用4倍遞增稀釋;  [2] 空斑減少50%的血清稀釋度,其計算法同LD50的計算。

相關疾病

柯薩奇病毒感染,致腸細胞病變人孤兒病毒感染,夸賽納森林病,鄂木斯克出血熱,風疹,登革熱,人類T淋巴細胞病毒感染,微小病毒感染,人免疫缺陷病毒感染性腎損害,呼吸道合胞病毒感染

相關症狀

梅毒感染,梅毒肝,嗜心性病毒感染

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