southern 印記實驗法

southern 印記實驗又稱凝膠電泳壓印雜交技術，是southern於1975年建立的一種DNA轉移方法。該法利用硝酸纖維素膜或經過特殊處理的濾紙或尼龍膜具有吸附DAN功能，先作DNA 片段的凝膠電泳，並將凝膠電泳中的DNA 區帶吸附到膜上，然口具接在膜上進行核素標記核酸探針與被測樣品之間的雜交，再通過放射自顯影對雜交結果進行位測。Southern blot 不僅可以定位地確定DNA 中的特異序列，而且還可根據DNA 片段在凝股中的泳動距離確定特異DNA 片段分子質量的大小及其含量。

在進行Souther blot 時，先以限制性內切酶消化待檢的DNA 片段，進行瓊脂糖凝膠電泳，電泳完畢後，將凝膠放人鹼性溶液中，使雙DNA 鏈變性解離為兩條單鏈，再在凝膠上貼蓋硝酸纖維素膜，使膠上單鏈DNA 區帶按原來的位置吸印到膜上。再將此膜置於含有同位素標記的核酸探針的雜交液中反應。按照鹼基配對原理，如果被檢DNA 片段與核酸探針具有互補序列，就能在被檢DNA 的區帶部位結合成雙鏈的雜交分子，並通過放射自顯影顯示出來。