smith降解

Smith降解是將高碘酸氧化產物用硼氫化合物(如硼氫化鉀或硼氫化鈉)還原成穩定的多羥基化合物。然後進行適度的酸水解,用紙層析鑑定水解產物,由水解產物可以推斷多糖各組分的連線方式及次序。

基本介紹

  • 中文名:smith降解
  • 對象:高碘酸氧化產物
  • 產物:多羥基化合物
  • 反應劑:硼氫化鉀或硼氫化鈉)
  • 方法:還原和水解
【實驗操作】
1. 還原和水解
高碘酸氧化後經乙二醇處理的溶液對流水透析48小時,蒸餾水透析24小時,於40℃以下減壓濃縮至10ml左右,加入70mg硼氫化鉀於室溫、暗處攪拌18小時~24小時以還原多糖醛。用0.1 mol/L醋酸中和至pH6~7,對流水透析48小時,蒸餾水透析24小時,減壓蒸乾,加1 mol/L硫酸2ml,封管,100℃水解8小時,用碳酸鋇粉末中和,定量濾紙過濾,濾液減壓濃縮後,通過紙層析方法檢測。
2. 紙層析
操作詳見實驗2(單糖組成分析)。展層後,將濾紙取出,自然乾燥,噴上試劑A ,自然乾燥,將濾紙浸入試劑B中,待斑點顯出後,再浸入試劑C中以洗去濾紙上的氧化銀,然後用水沖洗1小時左右,風乾。以正丁醇:乙酸:水=4:l:5為展層劑時,甘油的Rf為:0.48,赤蘚醇的Rf為:0.35。

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