P1噬菌體載體

基本介紹

  • 中文名:P1噬菌體載體
  • 外文名:bacteriophage p1vector
  • 來源:順式作用元件
  • 容納:70~100kb大小的基因
簡介,特點,

簡介

P1噬菌體載體(bacteriophage p1vector) 含有許多P1噬菌體來源的順式作用元件,能容納70~100kb大小的基因組DNA片段。在這種系統中,含有基因組和載體序列的線狀重組分子在體外被組裝到P1噬菌體顆粒中,後者總容量可達115kb(包括載體和插入片段)。將載體注射到表達Cre重組酶的大腸桿菌中,線狀DNA分子通過重組於載體的兩個
Pad10sacBII圖譜Pad10sacBII圖譜
loxp位點之間而發生環化。另外,載體還攜帶一個通用的選擇性標記Kan r.一個區分攜帶外源DNA克隆的陽性標記sacB以及一個能夠使每個細胞都占有約一個拷貝環狀重組質粒的P1質粒複製子。另外一個Pl複製子(P1裂解性複製子)在可誘導的tac啟動子控制下,用於DNA分離前質粒的擴增。

特點

環狀載體的測含有兩個loxP,一十DNA複製質粒起始位點,一個包裝進入P1顆粒的最小信號序列pcc及一個腺病毒來源的填充片段。右側含有一個卡那黴素抗性基因kanR,一個噬菌體P1來源的複製子P1,該複製子能使低拷貝數的質粒在大腸桿菌中得到複製;一個可誘導強複製子(Pl裂解性複製子).該複製子能夠被用於增加質粒的拷貝數;還有一個選擇性標記sacB,該標記含有一個克隆位點(BamHI).位點兩端分別是噬菌體SP6和T7的啟動子

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