IPTG（異丙基硫代半乳糖苷，Isopropyl β-D-Thiogalactoside)是一種作用極強的誘導劑，不被細菌代謝而十分穩定，因此被實驗室廣泛套用。
基本介紹
- 中文名： 異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷
- 外文名：IPTG
- 通用CAS：367-93-1
- 分 子 式：C9H18O5S
- 別名：Isopropyl β-D-Thiogalactoside
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IPTG
中文品名: 異丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷
商品名稱: Isopropyl β-D-1-Thiogalactopyranoside
英文簡稱: IPTG
產品別名: Isopropyl β-D-Thiogalactoside
通用CAS : 367-93-1
產品純度: Sigma ≥99%, Merck ≥98% ，INALCO≥99%。
作為β-galactosidase的活性誘導物進行生物活性鑑定。
通過TLC分析確定純度。
產品性狀: 白色或白色粉末,溶於水後呈清亮無色液體
分 子 式: C9H18O5S
分 子 量: 238.30
保存溫度: 2-8°C冷藏保存，配製好後保存於-20°C，室溫可放置一個月
用 途：IPTG是β–半乳糖苷酶的活性誘導物質。基於這個特性，當pUC系列的載體DNA（或其他帶有lacZ 基因載體DNA）以lacZ 缺失細胞為宿主進行轉化時、或用M13噬菌體的載體DNA進行轉染時，如果在平板培養基中加入X–gal和IPTG，由於β–半乳糖苷酶的α–互補性，可以根據是否呈現白色菌落（或噬菌斑）而方便地挑選出基因重組體。此外，它還可以作為具有lac或tac等啟動子的表達載體的表達誘導物使用。
誘導原理
首先
E.coli的乳糖操縱子（元）含Z、Y及A三個結構基因，分別編碼半乳糖苷酶、滲透酶和乙醯基轉移酶，此外還有一個操縱序列O、一個啟動序列P及一個調節 基因I。I基因編碼一種阻遏蛋白，後者與O序列結合，使操縱子（元）受阻遏而處於關閉狀態。在啟動序列P上游還有一個分解（代謝）物基因激 活蛋白（CAP）結合位點。由P序列、O序列和CAP結合位點共同構成lac操縱子的調控區，三個酶的編碼基因即由同一調控區調節，實現基因產物的協調錶達 。
其次
在沒有乳糖存在時，lac操縱子（元）處於阻遏狀態。此時，I序列在PI啟動序列操縱下表達的Lac阻遏蛋白與O序列結合，阻礙RNA聚合酶與P序列結合，抑制轉錄啟動。當有乳糖存在時，lac操縱子（元）即可被誘導。在這個操縱子（元）體系中，真正的誘導劑並非乳糖本身。乳糖進入細胞，經β-半乳糖苷酶催化，轉變為異乳糖。後者作為一種誘導劑分子結合阻遏蛋白，使蛋白構象變化，導致阻遏蛋白與O序列解離、發生轉錄。異丙基硫代半乳糖苷（IPTG）的作用與異乳糖相同，是一 種作用極強的誘導劑，不被細菌代謝而十分穩定，因此被實驗室廣泛套用。
