《Bim在介導非小細胞肺癌ALK抑制劑獲得性耐藥中的機制研究》是依託同濟大學，由任勝祥擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Bim在介導非小細胞肺癌ALK抑制劑獲得性耐藥中的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：任勝祥
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
間變淋巴瘤激酶（ALK）抑制劑在具有EML4-ALK基因融合的晚期非小細胞肺癌患者中發揮重要作用，然而耐藥已成為其治療瓶頸，耐藥機制尚未闡明。ALK基因活化主要通過Akt、ERK和STAT3通路發揮作用, ALK抑制劑則通過誘導敏感細胞Bim的表達來發生凋亡。我們前期研究發現Crizotinib（ALK抑制劑）誘導敏感細胞株產生Bim的表達，而在耐藥珠中並未出現。 我們推測Bim參與了ALK抑制劑使用後的獲得性耐藥，但具體調控機制有待闡明。因此本課題擬採用基因晶片、基因轉染、siRNA、RT-PCR、western bolt等方法在細胞和動物水平探討Bim與PI3K/Akt、MEK/ERK、JAK/STAT3信號傳導通路的關係，明確Bim在ALK抑制劑獲得性耐藥中的作用和機制,並通過臨床標本加以驗證，從而進一步闡明ALK抑制劑獲得性耐藥的分子調控機制，並為逆轉耐藥提供可能的候選靶點和思路。
結題摘要
本研究通過CRIZOTINIB 誘導含EML-ALK融合基因的NSCLC細胞株H2228和H3122， 並檢測BIM在敏感株和耐藥株中表達的區別， 發現在耐藥株中存在BIM的低表達， 並沉默和轉染BIM後發現細胞對於CRIZOTINIB的敏感性發生變化。同時， 採用Western blot 檢測Crizotinib 敏感株與耐藥株對於信號轉導通路的影響， 發現PI3K/AK時影響BIM表達的主要通路。 隨後在臨床標本上檢測了BIM的SNP缺失，發現其SNP缺失為原發性耐藥的主要原因，在檢測BIM的SNP的同時， 發現並報導了一例非典型ALK融合基因陽性的患者， 提示ALK檢測的金標準FISH方法可能存在漏診ALK融合基因檢測的可能。 隨後在臨床上255例患者中對比了這2中檢測方法的敏感性， 發現RT-PCR的方法能夠更敏感的檢測出ALK融合基因。獲得性耐藥機制在臨床上的探索套用首先需要確定患者是否存在ALK融合基因， 本研究臨床部分內容也進一步的採用RT-PCR的方法來檢測ALK融合， 發現細胞學的方法也是一種可行的方法用於ALK融合基因的檢測。
