顯微吸收光度測量

顯微吸收光度測量是基於細胞內的蛋白質、多糖、核酸、脂類等能在不同等電點下電離出不同基團。使用不同的螢光染料可以與這些基團特異性地結合,從而使不同的細胞組分染上不同的顏色,在顯微鏡下成為可見的結構。是一種光度測量的化學方法。

染料與組分的結合必須是特異性的,即染料、細胞組分結合物的光吸收是遵循比爾-朗伯定律,而且染色深淺與被染細胞組分之間呈化學劑量學關係。當光束通過固體、液體或氣體介質時,常有部分光被吸收轉換成其他形式的能量。介質吸收特性必須遵循比爾-朗伯定律,當單色的平行光通過均勻溶液時,溶液的吸收能力與溶液的路程長度及溶質濃度成正比。可通過消光度A來確定。A=-lgT=lgⅠo/Ⅰ=K*l*c其中T為溶液透光率,Ⅰo和Ⅰ分別為入射光強和透射光強,K為吸收係數,1為吸收介質的厚度,c為吸光物質的濃度。

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