雙向性電泳

雙向性電泳是等電聚焦電泳和SDS-PAGE的組合,即先進行等電聚焦電泳(按照pI分離),然後再進行SDS-PAGE(按照分子大小),經染色得到的電泳圖是個二維分布的蛋白質圖。蛋白質組研究的發展以雙向電泳技術作為核心. 雙向性電泳由O'Farrell's於1975年首次建立並成功地分離約1 000個E.coli蛋白,並表明蛋白質譜不是穩定的,而是隨環境而變化。

樣品製備(sample prepareation)和溶解同樣事關2-DE的成效,目標是儘可能擴大其溶解度和解聚,以提高解析度. 用化學法和機械裂解法破碎以儘可能溶解和解聚蛋白,兩者聯合有協同作用. 對IEF(isoelectric focusing)樣品的預處理涉及溶解、變性和還原來完全破壞蛋白間的相互作用,並除去如核酸等非蛋白物質。

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