酶偶聯反應法

酶偶聯法測定,即在反應體系中加入一個或幾個工具酶,將待測酶生成的某一產物轉化為新的可直接測定的產物,當加入酶的反應速度與待測酶反應速度達到平衡時,可以用指示酶的反應速度來代表待測酶的活性。

基本介紹

  • 中文名:酶偶聯反應法
  • 做法:在反應體系加入一個或幾個工具酶
  • 時間:酶活性測定時
  • 示例:Ex   Ea    EiA → B → C→p
在酶活性測定時,如果底物或產物不能直接測定或難於準確測定,可採用。例如:
Ex Ea Ei
A → B → C→p
式中A為底物,B、C為中間產物,P為可直接測定的產物;Ex為待測酶,Ea和Ei都為工具酶,依據工具酶作用的不同又分別稱為輔助酶和指示酶;輔助酶在酶偶聯反應中可以一個或多個,也可以不需要;指示酶是指能監測反應速度的酶。臨床酶學分析中,以NAD(P)H/ NAD(P)+為輔酶的脫氫酶和以H2O2為底物的過氧化物酶(POD)是常用的指示酶。

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