血細胞化學染色是細胞學和化學相結合而形成的一門科學，它以細胞形態學為基礎，結合運用化學反應的原理對血細胞內的各種化學物質進行定性、定位、半定量分析的方法。該類方法對於血細胞的正常生理功能的了解、某些血液病的診斷和鑑別診斷、療效和判斷預後都有一定的幫助，並且對於發病原理的探討也有一定意義。
基本介紹
- 中文名：血細胞化學染色
- 臨床意義：血細胞的正常生理功能的了解
常見染色方法,
常見染色方法
1．過氧化物酶染色（POX）
（1）原理：過氧化物酶能分解過氧化氫而釋放出新生態氧，使無色聯苯胺氧化成藍紫色，後者與硝普鈉結合形成藍黑色的顆粒，沉澱於細胞質中。
（2）操作方法：將固定液滴加在新鮮骨髓或血塗片上，固定30秒，流水沖洗，晾乾。將套用也滴加在血膜上，作用10～15分鐘，流水沖洗。用蘇木素或吉姆薩液復染10分鐘，流水沖洗，晾乾鏡檢。
（3）正常參考範圍：陰性。
（4）臨床意義：急性粒細胞白血病時，白血病細胞多呈強陽性；急性單核細胞白血病呈弱陽性或陰性；急性淋巴細胞白血病呈陰性反應。主要用於急性粒細胞白血病和急性淋巴細胞白血病的鑑別。
2．α-醋酸萘酚酯酶染色（α-NAE）
（1）原理：α-醋酸萘酚酯酶能將基質液中的α-醋酸萘酚水解，產生α-萘酚，再與重氮染料偶聯，可形成不溶性的有色沉澱，沉澱於細胞質中。
（2）操作方法：將甲醛生理鹽水滴加在2張新鮮骨髓或血塗片上固定5分鐘，或用甲醛蒸汽固定5～10分鐘後，流水沖洗，晾乾。將2張塗片分別放入兩份基質液中，置於37℃水浴60分鐘，流水沖洗。甲基綠溶液復染5～10分鐘，流水沖洗，晾乾鏡檢。
（3）正常參考範圍：陰性。
（4）臨床意義：急性單核細胞白血病細胞呈強陽性，但由於α-醋酸萘酚酯酶的活性會被氟化鈉抑制，故染色時常同時做氟化鈉抑制試驗。急性粒細胞白血病時，呈陰性或弱陽性，不被氟化鈉抑制。主要用於急性單核細胞白血病與急性粒細胞白血病的鑑別。
3．中性粒細胞鹼性磷酸酶染色（NAP）
（1）原理：中性粒細胞鹼性磷酸酶在pH 9.6左右環境中，能水解磷酸萘酚鈉底物釋放出萘酚，後者與重氮染料偶聯，可形成不溶性的有色沉澱（紅色顆粒），定位於細胞酶活性所在處。
（2）操作方法：將固定液覆蓋於新鮮血片30～60秒，流水沖洗，晾乾。將塗片置基質液，或漿基質液直接滴加在血膜上，37℃水浴45分鐘，流水沖洗，晾乾。甲基綠復染5～10分鐘，流出沖洗，晾乾鏡檢。
（3）正常參考範圍：中性粒細胞鹼性磷酸酶陽性率為10%～40%；中性粒細胞鹼性磷酸酶指數為35～70分。
（4）臨床意義：中性粒細胞鹼性磷酸酶活性增高可見於細菌性感染、類白血病反應、再生障礙性貧血、急慢性淋巴細胞白血病、多發性骨髓瘤等；活性下降見於慢性粒細胞白細胞、陣發性睡眠性血紅蛋白尿症、骨髓增生異常綜合徵等。可用於慢性粒細胞白血病和類白血病反應的鑑別、細菌性感染與病毒性感染的鑑別、再生障礙性貧血與陣發性睡眠性血紅蛋白尿症的鑑別等。
4．鐵染色
（1）原理：人體內有一定量的以鐵蛋白和含鐵血黃素形式貯存的鐵元素，這些鐵在酸化的低鐵氰化鉀溶液中反應，生成藍色的亞鐵氰化鐵沉澱（普魯士藍），定位於含鐵的部位。
（2）操作方法：將染色液滴加在骨髓小粒豐富的骨髓塗片上，室溫20～30分鐘，流水沖洗，晾乾，觀察中幼紅細胞、晚幼紅細胞胞質中的鐵。
（3）正常參考範圍：細胞外鐵，“+”～“++”；細胞內鐵，鐵粒幼細胞陽性率19%～44%，以Ⅰ型為主，少數為Ⅱ型。
（4）臨床意義：是目前診斷缺鐵性貧血及指導鐵劑治療的檢驗方法之一。對骨髓增生異常綜合徵分型的診斷也有意義。
5．糖原染色（PAS）
（1）原理：過碘酸將血細胞內的糖原氧化，生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結合，形成紫色化合物，定位於細胞質中。
（2）操作方法：乾燥塗片，滴加甲醛固定液固定10分鐘，流水沖洗，晾乾。滴加過碘酸溶液作用20分鐘，流水沖洗，晾乾。滴加雪夫液作用60分鐘，流水沖洗，晾乾。滴加甲基綠溶液復染10分鐘，流水沖洗，晾乾鏡檢。
（4）臨床意義：根據染色陽性程度和陽性物形態鑑別主要用於急性淋巴細胞白血病和急性非淋巴細胞白血病鑑別，還有助於紅白血病與巨幼細胞貧血和溶血性貧血的鑑別診斷。
（1）原理：過氧化物酶能分解過氧化氫而釋放出新生態氧，使無色聯苯胺氧化成藍紫色，後者與硝普鈉結合形成藍黑色的顆粒，沉澱於細胞質中。
（2）操作方法：將固定液滴加在新鮮骨髓或血塗片上，固定30秒，流水沖洗，晾乾。將套用也滴加在血膜上，作用10～15分鐘，流水沖洗。用蘇木素或吉姆薩液復染10分鐘，流水沖洗，晾乾鏡檢。
（3）正常參考範圍：陰性。
（4）臨床意義：急性粒細胞白血病時，白血病細胞多呈強陽性；急性單核細胞白血病呈弱陽性或陰性；急性淋巴細胞白血病呈陰性反應。主要用於急性粒細胞白血病和急性淋巴細胞白血病的鑑別。
2．α-醋酸萘酚酯酶染色（α-NAE）
（1）原理：α-醋酸萘酚酯酶能將基質液中的α-醋酸萘酚水解，產生α-萘酚，再與重氮染料偶聯，可形成不溶性的有色沉澱，沉澱於細胞質中。
（2）操作方法：將甲醛生理鹽水滴加在2張新鮮骨髓或血塗片上固定5分鐘，或用甲醛蒸汽固定5～10分鐘後，流水沖洗，晾乾。將2張塗片分別放入兩份基質液中，置於37℃水浴60分鐘，流水沖洗。甲基綠溶液復染5～10分鐘，流水沖洗，晾乾鏡檢。
（3）正常參考範圍：陰性。
（4）臨床意義：急性單核細胞白血病細胞呈強陽性，但由於α-醋酸萘酚酯酶的活性會被氟化鈉抑制，故染色時常同時做氟化鈉抑制試驗。急性粒細胞白血病時，呈陰性或弱陽性，不被氟化鈉抑制。主要用於急性單核細胞白血病與急性粒細胞白血病的鑑別。
3．中性粒細胞鹼性磷酸酶染色（NAP）
（1）原理：中性粒細胞鹼性磷酸酶在pH 9.6左右環境中，能水解磷酸萘酚鈉底物釋放出萘酚，後者與重氮染料偶聯，可形成不溶性的有色沉澱（紅色顆粒），定位於細胞酶活性所在處。
（2）操作方法：將固定液覆蓋於新鮮血片30～60秒，流水沖洗，晾乾。將塗片置基質液，或漿基質液直接滴加在血膜上，37℃水浴45分鐘，流水沖洗，晾乾。甲基綠復染5～10分鐘，流出沖洗，晾乾鏡檢。
（3）正常參考範圍：中性粒細胞鹼性磷酸酶陽性率為10%～40%；中性粒細胞鹼性磷酸酶指數為35～70分。
（4）臨床意義：中性粒細胞鹼性磷酸酶活性增高可見於細菌性感染、類白血病反應、再生障礙性貧血、急慢性淋巴細胞白血病、多發性骨髓瘤等；活性下降見於慢性粒細胞白細胞、陣發性睡眠性血紅蛋白尿症、骨髓增生異常綜合徵等。可用於慢性粒細胞白血病和類白血病反應的鑑別、細菌性感染與病毒性感染的鑑別、再生障礙性貧血與陣發性睡眠性血紅蛋白尿症的鑑別等。
4．鐵染色
（1）原理：人體內有一定量的以鐵蛋白和含鐵血黃素形式貯存的鐵元素，這些鐵在酸化的低鐵氰化鉀溶液中反應，生成藍色的亞鐵氰化鐵沉澱（普魯士藍），定位於含鐵的部位。
（2）操作方法：將染色液滴加在骨髓小粒豐富的骨髓塗片上，室溫20～30分鐘，流水沖洗，晾乾，觀察中幼紅細胞、晚幼紅細胞胞質中的鐵。
（3）正常參考範圍：細胞外鐵，“+”～“++”；細胞內鐵，鐵粒幼細胞陽性率19%～44%，以Ⅰ型為主，少數為Ⅱ型。
（4）臨床意義：是目前診斷缺鐵性貧血及指導鐵劑治療的檢驗方法之一。對骨髓增生異常綜合徵分型的診斷也有意義。
5．糖原染色（PAS）
（1）原理：過碘酸將血細胞內的糖原氧化，生成醛基。醛基與雪夫液中的無色品紅結合，形成紫色化合物，定位於細胞質中。
（2）操作方法：乾燥塗片，滴加甲醛固定液固定10分鐘，流水沖洗，晾乾。滴加過碘酸溶液作用20分鐘，流水沖洗，晾乾。滴加雪夫液作用60分鐘，流水沖洗，晾乾。滴加甲基綠溶液復染10分鐘，流水沖洗，晾乾鏡檢。
（4）臨床意義：根據染色陽性程度和陽性物形態鑑別主要用於急性淋巴細胞白血病和急性非淋巴細胞白血病鑑別，還有助於紅白血病與巨幼細胞貧血和溶血性貧血的鑑別診斷。
