膽固醇氧化酶

膽固醇氧化酶

膽固醇氧化酶及膽固醇脂酶一起用於血脂類項目如高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)以及總膽固醇(TC/CHO/CHOL)等。

基本介紹

  • 中文名:膽固醇氧化酶
  • 外文名:cholesterol oxidase
  • CAS:9028-76-6
  • EINECS:232-842-1
  • 縮寫:COD
膽固醇氧化酶,

膽固醇氧化酶

中文名稱:膽固醇氧化酶
英文名稱:cholesterol oxidase from nocardia ery-thropolis
英文別名:Cholesterol Oxidase from Pseudomonas sp.; cholesterol oxidase F. pseudomonas sp.; Cholesterol Oxidase Nocardia erythropolis; Cholesterol Oxidase, Streptomyces sp.
酶學分類號為EC 1.1.3.6。
該酶催化Cholesterol + O2--→ Choleste-4-en-3-one + H2O2。
血清中總膽固醇 (total cholesterol , TC) 包括游離膽固醇 (free cholesterol , FC) 和膽固醇酯 (cholesterol ester , CE) 兩部分。血清中膽固醇酯可被膽固醇酯酶水解為游離膽固醇和游離脂肪酸 (FFA) ,膽固醇在膽固醇氧化酶的氧化作用下生成△ 4- 膽甾烯酮和過氧化氫。
膽固醇氧化酶基因(cholesterol oxidase,Cho)也被稱為第二代抗蟲基因,其表達的產物是一類新型殺蟲劑。在鏈黴菌屬(Streptomyces)、短桿菌屬(Brevibacterium)、假單胞菌屬(Pseudomonas)、紅球菌屬(Schizopylium)等細菌中均發現有膽固醇氧化酶。目前已從鏈黴菌屬中分離出膽固醇氧化酶基因,其編碼的膽固醇氧化酶屬於乙醯膽固醇氧化酶家族的成員,可催化膽固醇形成17-酮類固醇和過氧化氫。膽固醇是細胞膜的主要組分,伴隨著上述反應,攝食昆蟲的腸道表皮細胞出現胞溶現象,由此導致昆蟲死亡。
David等人(1994)從Streptomyces A19249中分離得到膽固醇氧化酶基因(ChoM)。ChoM的編碼基因全長1512bp,編碼504個胺基酸。原始的ChoM編碼基因5'端帶有129bp的前導序列,編碼43個胺基酸的短肽。將5'端修飾的不帶有前導序列的全長ChoM基因構建到載體pKK233-2中,得到兩個表達載體,發現在帶有前導序列的全長ChoM基因的大腸桿菌培養液中可檢測到較高水平的膽固醇氧化酶活性,而在只有ChoM編碼基因的大腸桿菌中幾乎檢測不到膽固醇氧化酶活性。研究人員又將它們構建到植物表達載體pMON1772上,並用電擊法轉化菸草原生質體,發現帶有前導序列的全長膽固醇氧化酶基因其表達量比只有ChoM編碼基因的表達量高2-5倍。這表明N端前導序列可能對蛋白表達有明顯的增強作用。生物測試結果表明:膽固醇氧化酶對棉鈴象甲(Boll weevil)及煙青蟲(Tobacco Budworm)有明顯的毒殺作用,有效作用濃度與Bt殺蟲晶體蛋白類似。
棉鈴象甲是世界性的棉花主要害蟲之一,為害部位是棉鈴,成蟲將卵產於棉花花蕾內,幼蟲在棉鈴上完成整個發育過程。由於常規的化學藥劑很難到達花蕾內,因此難以控制這類害蟲,利用轉基因棉花自身產生的殺蟲蛋白則能獲得理想的殺蟲效果。目前常用的轉Bt殺蟲蛋白基因的棉花對棉鈴蟲有明顯的防治效果,但是對棉鈴象甲作用不大,膽固醇氧化酶可能彌補這一不足。

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