基本介紹
- 中文名：亞甲基藍還原實驗
- 外文名：Methylene blue reduction reaction
原理,試劑,儀器,步驟,結果評估,影響因素,細菌的活性,溶液的褪色時間與染色液的濃度有關,可檢驗異常乳,褪色時間相當每ml牛乳中的細菌總數,
原理
美蘭還原試驗是用來判斷原料乳新鮮程度的一種色素還原試驗。新鮮乳加入亞甲基蘭後染為藍色。如污染大量微生物產生還原酶使顏色逐漸變淺，直至無色，通過測定顏色變化時間，間接推斷出鮮奶的衛生質量。
試劑
亞甲基藍水溶液， 0.01g/300 ml
儀器
試管，20 mm×200 mm
水浴鍋：可恆溫到38℃
步驟
1. 吸取10 ml牛奶於滅菌試管中，在水浴中加熱到38 ℃，再加入亞甲基藍溶液1 ml，混勻；
2. 將試管放入水浴中，每30 min觀察一次褪色情況，並記錄每個樣品褪色時間。
結果評估
通過溶液的褪色時間可以估算出牛奶中細菌總數。
影響因素
細菌的活性
由於原奶在實驗前冷藏時間的延長，傳統的適溫菌型（產酸菌的牛奶菌絲），逐漸轉換為嗜冷菌型（分解蛋白質和脂肪的菌絲），脫色時間和細菌總數之間的相關性變弱。
溶液的褪色時間與染色液的濃度有關
可檢驗異常乳
此方法對體細胞（白細胞）及其他細胞的還原作用也敏感，因此還可檢驗異常乳（乳房炎及初乳或末乳）。
褪色時間相當每ml牛乳中的細菌總數
20 min >2×107
20-40 min 1.0×107—2.0×107
40 min-1 h 5.0×106—1.0×107
1 h-2 h 4.0×106—5.0×106
2 h-3 h3.0×106—4.0×106
3 h-4 h2.0×106—3.0×106
4 h-5 h 1.0×106—2.0×106
5 h-5.5 h 5.0×105—1.0×106
5.5 h-6.5 h3.0×105—5.0×105
6.5 h-7.5 h1.0×105—3.0×105
>7.5 h <1.0×105
註：此方法較適用於原料奶的驗收檢驗，所以一半時間控制在40 min之內觀察為宜。
