（PMN-Elastase）精漿彈性硬蛋白酶是檢測炎症的手段之一，精漿彈性硬蛋白酶可作為靜止型生殖道感染的診斷及愈後檢測指標。
基本介紹
- 中文名：精漿彈性硬蛋白酶
- 外文名：PMN-Elastase
- 類型：檢驗炎症的手段之一
- 套用臨床：檢查男性生殖道感染
臨床套用,檢測原理,檢測步驟,判斷標準,
臨床套用
精漿彈性硬蛋白酶臨床上主要用於檢查男性生殖道感染。
檢測原理
包被於固相載體的抗彈性硬蛋白酶單抗可與精漿中彈性硬蛋白酶相結合，結合的待測物再與特異性酶標記物反應，最後通過底物顯色，其吸光度大小與精漿標本中彈性硬蛋白酶濃度相關。
檢測步驟
（1）準備適當數量的包被微孔。標準品、稀釋標本加樣量均為100μl/孔。五個標準品濃度依次為3000、1500、750、375 和0ng/ml（以標本稀釋液作為0 標準）。
（2）用封片膜封板。以孵育振盪器（350 ～400rpm）室溫（18 ～28℃）反應60min。
（3）棄去封板膜。洗板： 以洗滌液注滿微孔,每次浸泡1min,共洗板5 次。扣乾。
（4）每孔加酶結合物100μl。用封板膜封板。以孵育振盪器（ 350 ～400rpm） 室溫（18 ～28℃）反應45min。
（5）棄去封板膜。洗板：以洗滌液注滿微孔，每次浸泡1min, 共洗板5 次。扣乾。
（6）每孔加顯色液100μl, 室溫避光反應20min[顯色液臨用前配製。方法是：顯色劑A: 顯色劑B按體積比40: 1混合（ 如顯色劑A 400μl + 顯色劑B 10μl）,顯色液配製後30min 內使用]。
（7） 每孔加終止液100μl,充分混勻。15min 內上酶標儀雙波長450/630nm 比色。
判斷標準
判斷標準數值：< 290ng /ml, 隱性感染: 290 ～1000ng/ml, 確證感染: > 1000ng/ml。急性炎症時, 彈性硬蛋白酶複合物濃度迅速從正常水平升高超過290ng/ml, 直到炎症被治癒, 否則還是保持高水平。當臨床上檢查到有微生物感染, 炎症即可被診斷。
