稀釋倒平板法

稀釋倒平板法（Pour Plate Method）又稱：澆注平板法。先將待分離的材料用無菌水作一系列的稀釋（如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …），然後分別取不同稀釋液少許，與已溶化並冷卻至 45 ℃左右的瓊脂培養基混合，搖勻後，傾入滅過菌的培養皿中，待瓊脂凝固後，製成可能含菌的瓊脂平板，保溫培養一定時間即可出出菌落。

概述

如果稀釋得當，在平板表面或瓊脂培養基中就可出現分散的單個菌落，這個菌落可能就是由一個細菌細胞繁殖形成的。隨後挑取該單個菌落，或重複以上運算元次，便可得到純培養。

倒平板的兩種方法

持皿法

⑴將若干無菌培養皿疊放在左側，便於拿取。

⑵點燃煤氣燈，將火焰調到適中（空氣不要太大，以免氣流過急）。

⑶倒平板時，先用左手握住錐形瓶的底部，傾斜錐形瓶，用右手旋鬆棉塞，然後用右手的小指和手掌邊緣夾住棉塞並將它拔出（切勿將棉塞放在桌面上），隨之將瓶口周緣在火焰上過一下（不可灼燒，以防爆裂，以殺死可能沾在瓶口外的雜菌)。然後將錐形瓶從左手傳至右手中（用右手的拇指、食指和中指拿住三角瓶的底部），在這操作過程中瓶口應保持在離火焰2~3cm處，瓶口始終向著火焰。

左手拿起一套培養皿，用中指、無名指和小指托住培養皿底部，用食指和大拇指夾住皿蓋並開啟一縫，恰好能讓三角瓶伸入，隨後倒出培養基。一般約倒入12ml的培養基即可鋪滿整個皿底。蓋上皿蓋，置水平位置等凝。然後再將三角瓶移至左手，瓶口再次過火併塞緊棉塞。

平板培養基的冷凝方法有兩種，一種是將平板一個個攤開在桌面上冷凝，另一方法是將幾個平板疊在一起冷凝。前者冷凝速度較快，在室溫較高時採用；而後者冷凝速度較慢，可在室溫較低時採用，其優點是形成冷凝水少，尤其適用於平板劃線等的需要。

疊皿法

此法步驟與持皿法基本相同。不同點是左手不必持培養皿，而是將培養皿疊放在煤氣燈的左側並靠近火焰，用右手拿住三角瓶的底部，左手的掌背對著瓶口，用小指與無名指夾住瓶塞，將其拔出，隨即使瓶口過火，同時用左手開啟最上面的皿蓋，倒入培養基，蓋上皿蓋即移至水平位置待凝。再依次倒下面的平板。在操作過程中，瓶口應向著火焰保持傾斜狀，以防空氣中微生物的污染。