福林試劑

福林試劑，是多種化合物配製成的混合物，可用比色法測定。

基本介紹

• 中文名：福林試劑
• 測定：比色法
• 性質：混合物
• 領域：化學

原理

蛋白質或多肽分子中有帶酚基酪氨酸或色氨酸，在鹼性條件下，可使酚試劑中的磷鉬酸化合物還原成藍色（生成鉬藍和鎢藍化合物）。藍色的深淺與蛋白質的含量成正比， 可用比色法測定。

福林試劑的配製

於2000ml磨口回流裝置內加入鎢酸鈉（Na2WO4·2H2O）100g，鉬酸鈉（NaMoO4·2H2O）25g。水700ml，85%的磷酸50ml，濃鹽酸100ml，文火回流10h，加入硫酸鋰（Li2SO4）150g，蒸餾水50ml，混勻取去冷凝器，加入幾滴液體溴，再蒸沸15min，以驅逐殘溴及除去顏色，溶液應呈黃色。若溶液有綠色，需再加數滴液溴，再蒸沸除去，冷卻後定容至1000ml,過濾，濾液置於棕色瓶中。

測定方法

將1ml標準蛋白溶液和5ml0.025mol/lPH7.5的磷酸緩衝液加入試管中，在40℃保溫10min，迅速加入1ml酶液，保溫15min後加入3ml10%的三氯乙酸中止反應。取濾液1ml加入0.55M的碳酸鈉溶液5ml和福林試劑0.5ml，40℃水浴10min顯色，在OD680處比色。