基本介紹
- 中文名：濃縮效應
- 外文名：Concentration effect
- 構成：SDS-PAGE、PH值等
- 特徵：緩衝液離子成分的不連續性
- 分離對象：蛋白質分子
- 成型狀態：縫帶
條件,原理,
條件
在不連續電泳系統中，含有上、下槽緩衝液(Tris—Gly，pH8.3)、濃縮膠緩衝液(Tri s—HCl，pH6．8)、分離膠緩衝液(Tri s—HCl， pH8．8)，兩種凝膠的濃度(即孔徑)也不相同。
原理
在這種條件下，緩衝系統中的HCl幾乎全部解離成Cl-，兩槽中的Gly(pI一6．0，pK a=9．7) 只有很少部分解離成Gly的負離子，而酸性蛋白質也可解離出負離子。這些離子存電泳時都向正極移動。Cl-速度最快(先導離子)，其次為蛋白質，Gly負離子最慢(尾隨離子)。由於Cl-很快超過蛋白離子，因此存其後面形成一個電導較低、電位梯度較陡的區域，該區電化梯度最高，這是在電泳過程中形成的電化梯度的不連續性，導致蛋白質和Gly離子加快移動，結果使蛋白質進入分離膠之前，快、慢離子之間濃縮成一薄層，有利於提高電泳的解析度。
濃縮效應
SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳