活細胞離心淘洗法

活細胞離心淘洗法指的是處於細胞周期不同時期的細胞體積不同,而細胞在給定離心場中沉降的速度與其半徑的平方呈正比,因此可用離心淘洗轉子對細胞進行分離。通過離心淘洗,能依次獲取處於G1期、S期和G2+M期等不同時相的細胞。其優點是可用於任何是浮培養的細胞,缺點是同步化程度較低。

多細胞有機體是由不同類型細胞組成的,所以在研究多細胞有機體的細胞結構與功能時,常需要獲得單純類型的活細胞。此外,即使在同一種類型的增殖細胞群體中,細胞所處的周期時相(GO,Gl,S,G:和M)也不相同。為了研究細胞增殖與調控,也需要獲取同步的活細胞。 通常根據細胞的不同物理性質,如細胞大小、形狀、密度、表面電荷、表面結構的差異,利用沉降法、電泳、電磁場、纖維柱(碟)、帶孔的柱、分配分離(親水對疏水)和流式細胞分類術(FC影來分離單純類型的細胞。 細胞離心淘洗是細胞沉降分離的一種。該方法的原理是Lindehl於1 948年提出的。它的優點是:可以分離出大量活細胞(107一1護個);分離速度快(1一1.5小時),由於是在稍大於19的離心場條件下、在培養液中進行分離,對細胞活性的影響最小,能夠進行選擇性同步,獲得不同周期時相的細胞。

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