構建融合蛋白

構建的融合蛋白需要得到表達,因此可選擇質粒表達載體。

首先需要確定載體
質粒表達載體必需的條件包括選擇標記、複製起點、啟動子、起始密碼子、多克隆位點和轉錄終止子。
T7啟動子系統是常用的表達系統,含有T7啟動子、核糖體結合位點、起始密碼子、多克隆位點和轉錄終止子。
T7啟動子的RNA聚合酶有特殊菌株的基因組表達,該聚合酶基因以噬菌體溶源途徑整合入細菌基因組,由IPTG誘導表達。
在表達載體上構建好融合蛋白基因後,轉入宿主菌,在IPTG的誘導下表達出融合蛋白。

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