核苷酸序列分析法

核苷酸序列分析法是利用化學與生物化學手段對DNA或RNA序列進行測定,以進一步深入了解基因結構的分子生物學方法。最常用於DNA序列分析。有化學序列分析法、酶法以及雙脫氧鏈終止法MB序列分析技術等方法。其中雙脫氧鏈終止法MB序列分析技術因具有快速、準確、簡便,比化學序列法省力等優點,越來越受到研究者的重視。

雙脫氧鏈終止法MB序列分析技術大體分析步驟是:①將DNA克隆到MB的雙鏈複製型;②用帶扦入片段的載體轉化細胞並分離含插入片段的單鏈MBDNA;③以單鏈型DNA作模扳,利用DNA多聚酶大片段作引物延伸反應;④用序列分析凝膠分離不同長度的片段,依據凝膠放射自顯影像上條帶的位置可讀出此段DNA的核苷酸序列。

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