晶片免疫分析技術

晶片免疫分析技術

晶片免疫分析技術是一種將抗原抗體結合反應的特異性與電子晶片高密度集成原理相結合產生的一種全新概念的屬於一種生物檢測技術。

基本介紹

  • 中文名:晶片免疫分析技術
  • 外文名:Chip immunoassay technology
檢測原理,分類,套用,

檢測原理

將幾個、幾十個,甚至幾萬個或更高數量的抗原(或抗體)高密度排列在一起製成晶片,與患者待檢樣品與生物標本同時進行反應,可一次獲得晶片中所有已知抗原(或抗體)的檢測結果的高通量取得生物信息的先進檢測方法。

分類

根據載體不同:平板晶片、微球晶片、液體晶片;
根據實驗原理:雙抗體夾心法免疫晶片、間接法免疫晶片、競爭法免疫晶片、免疫-PCR晶片;
根據檢測方法:酶標免疫晶片、放射性同位素免疫晶片、螢光免疫晶片、金標免疫晶片。
1、晶片均相免疫反應
均相免疫反應是指抗原/抗體在同一介質中進行的免疫反應。可採用競爭法或非競爭法,常用雷射誘導螢光、電化學、酶免疫法等檢測晶片上分離物質的信號。
1996年,Koutny等首次將免疫測定和微流控電泳相結合,免疫反應先在一小試管中完成,然後將反應產物轉移至微晶片中進行分離檢測,用兔抗氫化可的松抗血清及螢光標記的氫化可的松來測定血清和尿液中氫化可的松濃度,利用晶片毛細管電泳在30 s內使抗原-抗體複合物、游離的標記抗原和待測抗原得到分離,測定濃度範圍0. 1-6μg/L。
2、非均相免疫反應
非均相免疫反應是指將抗原或抗體固定在固相載體表面,通過特異性免疫反應,將所需檢測的抗體或抗原結合在固相表面,繼經簡單的清洗,即可實現抗原-抗體複合物與游離的抗原、抗體之間的物理分離,且非均相免疫反應將抗原或抗體從稀溶液中富集至固相載體表面。因此,利用非均相免疫反應的分析方法具有更高的靈敏度。
晶片中進行非均相免疫反應主要有2種方式,一種是直接利用晶片通道壁為固相載體來包被抗原或抗體。Dodge等用中部為“Z”形十字形通道玻璃晶片,在十字交叉處形成一個165 pL的微型免疫反應室,先通過反應室兩側的旁路通道通入矽烷化試劑,處理反應室表面,再物理吸附固相化A蛋白,接著使花青素(Cy-5)標記的兔IgG與A蛋白結合,最後用pH值2.0的甘氨酸-HCl緩衝液洗脫Cy-5-兔IgG-A蛋白結合物,半導體雷射誘導螢光法檢測,整個分析時間大約7.5 min,抗體溫育時間大約200 s,IgG的最低檢測限為50 nmol/L。

套用

免疫晶片作為最重要的蛋白質晶片,其廣泛而重要的套用價值是不可忽視的。除了在蛋白質組計畫(後基因組計畫)和生物醫學領域起到對重要的蛋白質功能鑑定和疾病診斷作用外,免疫晶片還將在高通量藥物篩選、環境和農業檢測、食品衛生、生物武器戰爭等方面起到廣泛的套用。

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