明膠培養基

明膠培養基

明膠培養基是在水浴鍋中將NaCl-5g,蛋白腖-10g,牛肉膏-3g,明膠-120g,蒸餾水-1000mL這些成分溶化,不斷攪拌。溶化後調pH 7.2~7.4,115°C 滅菌15min(溫度過高明膠分子結構被破壞,不再凝固)。

基本介紹

  • 中文名:明膠培養基
  • 外文名:nutrient gelatin,meat infusion gelatin 
  • 作用:藥敏試驗
  • 領域:生物科學技術
試驗原理,試驗方法,套用,

試驗原理

明膠液化( gelaune liquefaction)指細菌把明膠分解成液狀的現象。這是因為有些細菌具有明膠酶(亦稱類蛋白水解酶),能將明膠先水解為多肽,又進一步水解為胺基酸,使其失去凝膠性質,從而使半固體的明膠培養基成為流動體,即液化。這種能力因細菌種類不同而有顯著差異,因此很早以來就被作為鑑別、測定細菌的一種特徵。例如:葡萄球菌屬、變形菌屬、芽孢桿菌屬物具有液化能力,而大腸桿菌就無這種液該培養基中蛋白腖和牛肉膏粉為微生物生長提供氮源、維生素、礦物質;某些含明膠酶的細菌水解明膠,使其液化而降低明膠的膠凝作用。

試驗方法

a稱取適量明膠培養基(營養明膠),加入蒸餾水或去離子水,攪拌加熱意沸至完全溶解,分裝試管高層,116℃高壓滅菌15min,垂直放置待培養基凝固後,備用;
b挑取18~24h待檢驗培養物,以較大量穿刺接種於明膠高層約2/3深度就點種於平板培養基;
c於20~22℃培養7到14天。明膠高層亦可於36±1℃培養;
d每天觀察結果,若因培養溫度高而使明膠本身液化時應不加搖動、將接種物放於2-8℃約10-90min待降溫後取出觀察,若果確實被液化,即為試驗陽性;平板試驗結果的觀察為在培養基平板點種的菌落上滴加試劑,若為陽性,10~20m落周圍應出現清晰帶環。否則為附性。

套用

臨床上主要用於腸桿菌科細菌的鑑別,如少雷菌、普通變形桿菌、奇昇變形桿菌、陰溝桿菌等可液化明膠,而其他細菌很少液化明膠。有些厭氧菌如產氣英膜梭菌、脆弱類桿菌等也能液化明膠。另外多數假單胞菌也能液化明膠。

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