放射自顯影技術

放射自顯影技術是利用放射性同位素的電離輻射對乳膠(含AgBr或AgCl)的感光作用,對細胞內生物大分子進行定性、定位與半定量研究的一種細胞化學技術。放射自顯影技術(radioautography;autoradiography)用於研究標記化合物在機體、組織和細胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用機理、作用部位等等。

基本介紹

  • 中文名:放射自顯影技術
  • 外文名:radioautography;
  • 原理:組織中的放射性即可使乳膠感光
  • 套用:顯示DNA
原理:
其原理是將放射性同位素(如14C和3H)標記的化合物導入生物體內,經過一段時間後,將標本製成切片或塗片,塗上鹵化銀乳膠,經一定時間的放射性曝光,組織中的放射性即可使乳膠感光。然後經過顯影、定影處理顯示還原的黑色銀顆粒,即可得知標本中標記物的準確位置和數量,放射自顯影的切片還可再用染料染色,這樣便可在顯微鏡下對標記上放射性的化合物進行定位或相對定量測定。 這種技術與電鏡樣品處理,則為電鏡放射自顯影。 由於有機大分子均含有碳、氫原子,故實驗室一般常選用14C和3H標記。14C和3H均為弱放射性同位素,半衰期長,14C為5730年,3H為12.5年。一般常用3H胸腺嘧啶脫氧核苷(3H-TDR)來顯示DNA,用3H尿嘧啶核苷(3H-UDR)顯示RNA;用3H胺基酸研究蛋白質,研究多糖則用3H甘露糖、3H岩藻糖等。
分類
1大體放射自顯影
研究放射性物質在整個生物體內或者生物體一個部分的分布,用x光片或者普通感光片做感光材料,結果用肉眼觀察
2光鏡放射自顯影
研究放射性物質在各種組織和細胞內的分布情況, 用核子乳膠做感光材料,結果用光鏡觀察
3電鏡放射自顯影
研究放射性物質在細胞超微結構上的分布, 用細顆粒核子乳膠做感光材料,結果用電鏡觀察。

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