外顯子捕捉法

外顯子捕捉法是構建一種載體,從其插入片段中識別和回收外顯子序列,從而克隆目的基因的方式。捕捉外顯子的載體pETV—SD是一種反轉錄病毒穿梭載體(shuttlevector),即可在不同種生物中如大腸桿菌和酵母,細菌和哺乳動物細胞等進行複製的載體。

凡是有內含子和外顯子的基因在轉錄後都要經過RNA剪接,這就需要有剪接供體位點和剪接受體位點。因此,SA位點可作為基因的標誌。pETV—咀載體的克隆位點上游有一個“外顯子捕捉序列”(exontrapcassette),可用來識別載體的插入片段中有無SA位點。

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