基因工程實驗指導（第3版）

成書過程

《基因工程實驗指導（第3版）》的修訂按照基礎性、前沿性以及通用性的要求，根據分子生物學與基因工程學科進展，對第2版的實驗進行了修改和增減，擴充了基因工程領域的新技術和新發展等（截至2015年6月）。

參加《基因工程實驗指導（第3版）》編寫的人員有：浙江大學的朱旭芬、嚴慶豐、趙小立與周宏老師；杭州師範大學的向太和老師；上海大學的文鐵橋與馮瑞麗老師以及東北農業大學的王傲雪與陳宏宇老師，教學視頻的拍攝與剪輯由周宏老師與研究生孫聰、蘇悅完成。《基因工程實驗指導（第3版）》的出版得到了高等教育出版社生命科學分社王莉、高新景等編輯的支持。

2014年，經全國範圍遴選和教育部高等學校生物技術、生物工程類專業教學指導委員會審定，《基因工程實驗指導（第3版）》被列入“高等學校生物技術與生物工程專業精品資源共享課及系列教材”建設項目。

2016年5月3日，《基因工程實驗指導（第3版）》由高等教育出版社出版。

內容簡介

《基因工程實驗指導（第3版）》以基因克隆為主線，實驗內容涉及核酸的提取與檢測，靶基因的獲取，基因定點突變、沉默與敲除，質粒的重組，原核及真核表達系統的構建與表達，蛋白質分析與目標產物分離等。每個實驗板塊由導言、知識導圖以及5- 9個不同的實驗組成，介紹了實驗的相關基本原理，為同一實驗項目提供了多種可供選擇的實驗方法，並對實驗相關的內容進行評議。

教材目錄

導論

第一節基因工程的四大要素

第二節基因克隆的策略

1 核酸的提取與檢測

1-1 基因組DNA 的提取

1-2 總RNA 和mRNA 的提取

1-3 噬菌體DNA 的提取

1-4 質粒DNA 的提取

1-5 核酸的檢測

1-6 脈衝場凝膠電泳

1-7 宏基因組文庫的構建

2 靶基因的獲取

2-1 PCR 擴增

2-2 目的基因片段的獲取

2-3 探針的標記及檢測

2-4 核酸探針篩選基因文庫

2-5 反轉錄PCR

2-6 RACE 方法

2-7 反向PCR

2-8 SiteFinding-PCR

2-9 功能基因的活性篩選

3 基因定點突變、沉默與敲除

3-1 基因定點突變

3-2 基因沉默技術

3-3 酵母基因的敲除

3-4 哺乳動物基因的敲除

3-5 植物基因的敲除

4 質粒的重組

4-1 T-A 克隆

4-2 感受態細胞的製備

4-3 重組質粒的轉化

4-4 陽性克隆的篩選

4-5 DNA 序列測定與序列同源性分析

5 原核表達系統的構建與誘導表達

5-1 DNA 的酶切反應

5-2 靶DNA 片段的分離純化

5-3 DNA 片段的連線

5-4 表達質粒的構建

5-5 Southern 印跡

5-6 靶基因的誘導表達

5-7 SDS-PAGE

6 真核表達系統的構建與表達

6-1 外源基因在酵母中的表達

6-2 外源基因在哺乳動物細胞中的表達

6-3 外源基因在植物細胞中的表達

6-4 qRT-PCR 分析

6-5 Northern 印跡

6-6 Western 印跡

6-7 螢光原位雜交

7 蛋白質的分析與目標產物分離

7-1 免疫螢光與雷射共聚焦

7-2 雙向電泳

7-3 酵母雙雜交

7-4 蛋白質濃度的測定

7-5 親和層析

參考文獻

附錄1 名詞縮寫

附錄2 實驗操作及儀器使用注意事項

附錄3 如何撰寫實驗報告

附錄4 常用鹼基、胺基酸符號及緩衝液

附錄5 大腸桿菌基因型

附錄6 實驗儀器

（註：目錄排版順序為從左列至右列）

教學資源

課程資源

《基因工程實驗指導（第3版）》配有Abook數字課程，該課程包括教學課件、微視頻、實驗彩圖、知識擴展、名詞縮寫、實驗儀器、電子表格、操作要點圖片、實驗結果照片和實驗報告範本等資源。

數字課程名稱	出版社	出版時間	內容提供者
“基因工程實驗指導（第3版）”數字課程	高等教育出版社、高等教育電子音像出版社	2016年1月	朱旭芬等

教材特色

1、《基因工程實驗指導（第3版）》既重視對基本操作的全面訓練，又突出新進展、新重點（截至2015年6月），還注重對學生學習興趣、綜合能力和創新能力的培養。

2、《基因工程實驗指導（第3版）》的實驗計畫表在第二版基礎上，增添了與目前科研接近、可個人獨立完成基因克隆與表達的第二套方案（截至2015年6月）。

作者簡介

朱旭芬，女，浙江大學生命科學學院博士、教授，從事微生物學與分子生物學方面的教學與科研，特別是嗜極微生物（厭氧微生物）資源以及功能基因的研究。