1988年，15歲的坂本昌行加入傑尼斯事務所。1995年9月4日，與長野博、井之原快彥、森田剛、三宅健以及岡田準一組成團體V6，並擔任隊長；同年11月1日，發行單曲《Music For The People》正式出道。
1992年，出演個人首部音樂劇《阿國》。1995年，出演舞台劇《魔女宅急便》。1998年，主演音樂劇《迷宮傳說・雨月之愛》。2000年，主演音樂劇《瑟堡的雨傘》，這也是他首部擔任主演的音樂劇。2001年，主演百老匯音樂劇《Footloose》。2003年，主演百老匯音樂劇《Blood Brothers》。2005年，分別主演了百老匯音樂劇《NEVER GONNA DANCE》和《THE BOY FROM OZ》。2009年，主演百老匯音樂劇《All Shook Up》。2010年，分別主演舞台劇《沒有不在場證明的天使》和百老匯音樂劇《酒綠花紅》。2011年，主演好萊塢英雄音樂劇《ZORRO THE MUSICAL》。2013年，搭檔東山紀之雙主演舞台劇《弗蘭肯斯坦》並同時飾演兩個角色。
2016年，舉辦個人首次音樂劇演唱會並主演舞台劇《MURDER FOR TWO》，同時憑藉該作品獲得第24回讀賣演劇大獎的優秀男演員獎。2017年1月，主演音樂劇《TWENTIETH TRIANGLE TOUR 戸惑いの惑星》；6月，主演舞台劇《你的人生時光》。2018年11月，主演音樂劇《TOP HAT（禮帽）》。2019年，舉辦個人音樂劇演唱會第二彈《ONE MAN STANDING 2019 The Greatest Symphony》。
1988年16歲時，由自己把履歷投到傑尼斯事務所，成為了傑尼斯的一份子。出道前曾經做過SMAP、TOKIO的候補成員，還擔任過東山紀之的貼身助理，但均未出道。1989年，辭去事務所工作，在一家旅遊代理公司做上班族，兩個月後因在上班途中偶遇KinKi Kids兩人，意識到自己對舞台工作的熱情後決意重返事務所並致電國分太一尋求重新加入的機會，次日社長喜多川回電，坂本昌行重新回到事務所。他在V6 Fan Club中的會員編號是2。
1995年9月4日，V6結成（並由V6中的年上三人坂本昌行、長野博和井之原快彥組成分組20th century，簡稱TC/トニセン），11月1日發行單曲《MUSIC FOR THE PEOPLE》正式出道。同年3月，出演舞台劇《魔女宅急便》，並與遠藤直人作為double cast交替出演；該舞台還於1996年5月舉行了再演，坂本昌行與長野博、原知宏共同作為三重角色交替演出。1996年3月，出演富士台月十劇《好日子遠行（いい日旅立ち〜4つの卒業〜）》。
1999年，以マーサ坂本名義擔任了迪斯尼電影《泰山》日本版主題曲《You'll Be in My Heart》及其插曲的演唱工作。同年12月31日，隨V6首次在NHK紅白歌合戰中的《英雄傳說》單元作為嘉賓登台獻唱。
2003年10月，與赤坂晃作為double cast交替雙主演百老匯音樂劇《Blood Brothers（兄弟情仇）》。同年11月，V6集體主演由薩布執導的懸疑喜劇電影《不幸運英雄》，坂本昌行飾演上班族池山忠志。2004年4月，20th century三人主演舞台劇《SAY YOU KIDS》，飾演前銀行職員野木良治。
2005年2月-3月，主演舞台劇《NEVER GONNA DANCE》。6月，主演百老匯音樂劇《THE BOY FROM OZ（來自奧茲的男孩）》，由於演出反響熱烈，該作品分別於2006年10月和2008年10月舉行了舞台再演。10月，V6再次集體主演電影，出演由薩布執導的懸疑喜劇電影《笨賊喪擒救世主》，該片為V6十周年紀念電影作品。2006年4月，主演《劇團演技者》第17回公演作：《複製品（レプリカ）》。同年6月，客串由豐川悅司主演的電視劇《垃圾律師》最終話。
2010年7月，主演舞台劇《沒有不在場證明的天使》，飾演專門偽造不在場證明的男人西村鉄雄；10月，在百老匯音樂劇《Pal Joey（酒綠花紅）》中飾演主角流浪歌手；11月，通過ZAI好萊塢英雄音樂劇日本版《ZORRO THE MUSICAL》的角色甄選，得到了出演主角佐羅的機會，該舞台作品由吉普賽國王樂隊擔任作曲，約翰·卡梅隆負責作曲、劇本改編，還曾獲得勞倫斯·奧利弗獎。該次試鏡可以說是坂本自1988年傑尼斯事務所入所以來所取得的重要工作之一。2011年1月，《ZORRO THE MUSICAL》正式在東京日生劇場開演，並於3月分別在名古屋中日劇場和大阪梅田藝術劇場展開巡迴演出。ZORRO THE MUSICAL
2012年3月，主演百老匯愛情音樂劇《MY ONE AND ONLY》，飾演夢想著乘飛機進行世界史上第一次大西洋無著陸橫斷飛行的Billy。同年4月，開始在富士電視台午間前開設的生活情報節目《Nonstop！（ノンストップ！）》中出演該節目美食環節“One Dish”，每周五為觀眾介紹並親手製作一道美食。同年5月，客串出演由大野智主演的月九推理劇《上鎖的房間》第6話，飾演編劇鬼冢隼人。7月，與若村麻由美、渡邊一計等合作，時隔四年出演由森村誠一同名小說系列改編的日劇特別篇《搜查線上的詠嘆調》，飾演編輯部的出版負責人夏川孝文。弗蘭肯斯坦
2014年9月~10月，20th Century時隔十年再次共同主演音樂劇，出演了曾獲得托尼獎的百老匯舞台音樂劇《ON THE TOWN（錦城春色）》日本版。同年，客串出演由淺野優子主演、同組合成員三宅健出演的午間劇《無法放任不管的魔女們》。12月31日，隨V6首次以正式歌手身份在第65屆NHK紅白歌合戰上登場。
2016年2月5日-7日，在東京Bunkamuraオーチャードホール舉辦首次個人音樂劇演唱會《ONE MAN STANDING》，這也是傑尼斯事務所藝人首次挑戰演唱全編音樂劇曲目的個人演唱會。4月，參加傑尼斯事務所舉辦的棒球大會，還通過全壘打斬獲了比賽的MVP。同年5月-6月，合作松尾貴史出演百老匯爆笑音樂劇《MURDER FOR TWO（兩個人的謀殺）》，兩人在其中一共飾演了包括老人和女人在內的十三個角色。為了演好角色的鋼琴戲份，他提前半年就借好了鋼琴每天在家中用三四個小時的時間來練習，也憑藉在此部作品中的表演獲得了第24回讀賣演劇大獎的優秀男演員獎。12月31日，隨V6連續第三年參加紅白歌合戰（第67屆）。
2017年1月~2月，隨20th Century主演舞台劇《TWENTIETH TRIANGLE TOUR 戸惑いの惑星》，坂本昌行飾演三池。同年6月，首次在東京新國立劇場表演舞台劇，在《你的人生時光》中飾演主角ジョー。與此同時，還出演了WOWOW電視台對第71屆托尼獎頒獎儀式的預熱節目特別篇，並於6月12日搭檔音樂劇演員井上芳雄在WOWOW播放的《現場轉播！第71屆托尼獎頒獎儀式》節目中合唱片頭曲。
坂本昌行 幼年
ZORRO THE MUSICAL
弗蘭肯斯坦
2014-09-01無法放任不管的魔女們飾 司會者 坂本昌行（友情出演）
2006-06-01劇團演技者飾 產婦人科醫・宮田
2003-11-18演技者。 TRASHMASTAURANT飾 米倉（ヨネ）
2002-06-25演技者。 錦鯉
2001-04-10少年タイヤ飾 下平警察官
2000-07-01忠臣蔵うら話･仲蔵狂亂飾 三太郎
2000-06-29I LOVE『big』大作戦飾 坂本昌行
1999-07-03俺たちの旅飾 街頭音樂家
1995-10-09V之炎飾 坂本昌行
1988-10危險少年3飾 川崎経由
