吸附色譜法

簡介

液固色譜的固定相是固體吸附劑。吸附劑是一些多孔的固體顆粒物質，位於其表面的原子、離子或分子的性質是不同於在內部的原子、離子或分子的性質的。表層的鍵因缺乏覆蓋層結構而受到擾動。因此，表層一般處於較高的能級，存在一些分散的具有表面活性的吸附中心。因此，液固色譜法是根據各組分在固定相上的吸附能力的差異進行分離，故也稱為液固吸附色譜。

吸附能力

吸附劑吸附試樣的能力，主要取決於吸附劑的比表面積和理化性質，試樣的組成和結構以及洗脫液的性質等。組分與吸附劑的性質相似時，易被吸附，呈現高的保留值；當組分分子結構與吸附劑表面活性中心的剛性幾何結構相適應時，易於吸附。從而使吸附色譜成為分離幾何異構體的有效手段。不同的官能團具有不同的吸附能力，因此，吸附色譜可按族分離化合物。吸附色譜對同系物沒有選擇性（即對分子量的選擇性小），不能用該法分離分子量不同的化合物。

色譜固定相

液固色譜法採用的固體吸附劑按其性質可分為極性和非極性兩種類型。極性吸附劑包括矽膠、氧化鋁、氧化鎂、矽酸鎂、分子篩及聚醯胺等。非極性吸附劑最常見的是活性炭。

極性吸附劑可進一步分為酸性吸附劑和鹼性吸附劑。酸性吸附劑包括矽膠和矽酸鎂等，鹼性吸附劑有氧化鋁、氧化鎂和聚醯胺等。酸性吸附劑適於分離鹼，如脂肪胺和芳香胺。鹼性吸附劑則適於分離酸性溶質，如酚、羧酸和吡咯衍生物等。

各種吸附劑中，最常用的吸附劑是矽膠，其次是氧化鋁。在現代液相色譜中，矽膠不僅作為液固吸附色譜固定相，還可作為液液分配色譜的載體和鍵合相色譜填料的基體。

色譜流動相

流動相要求

液相色譜的流動相必須符合下列要求：

（1）能溶解樣品，但不能與樣品發生反應。

（2）與固定相不互溶，也不發生不可逆反應。

（3）粘度要儘可能小，這樣才能有較高的滲透性和柱效。

（4）應與所用檢測器相匹配。例如利用紫外檢測器時，溶劑要不吸收紫外光。

（5）容易精製、純化、毒性小，不易著火，價格儘量低等。

流動相選擇

在液-固色譜中，選擇流動相的基本原則是極性大的試樣用極性較強的流動相，極性小的則用低極性流動相。

為了獲得合適的溶劑極性，常採用兩種、三種或更多種不同極性的溶劑混合起來使用，如果樣品組分的分配比k值範圍很廣則使用梯度洗脫。

適用範圍

吸附色譜法可以將吸附劑裝填於柱中、覆蓋於板上、或浸漬於多孔濾紙中。吸附劑是具有大表面積的活性多孔固體，例如矽膠、氧化鋁和活性炭等。活性點位例如矽膠的表面矽烷醇，一般與待分離化合物的極性官能團相互作用。分子的非極性部分（例如烴）對分離只有較小影響，所以液－固色譜法十分適於分離不同種類的化合物（例如，分離醇類與芳香烴）。