卟啉檢查法

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概述

卟啉是體內合成血紅蛋白等物質的中間產物,包括卟膽原,Ⅰ、Ⅲ型尿卟啉原和尿卟啉,Ⅰ、Ⅲ型糞卟啉原和糞卟啉。常採用尿液、糞便和紅細胞的卟啉檢查法。

操作名稱

卟啉檢查法

適應證

卟啉檢查可用於各種原發性和繼發性卟啉病。
1.紅細胞生成性卟啉病包括先天性紅細胞生成性卟啉病、紅細胞生成性原卟啉病、紅細胞生成性糞卟啉病等。
2.肝性卟啉病包括遲發性皮膚卟啉病、急性間歇性卟啉病、混合性卟啉病、遺傳性糞卟啉病等。

禁忌證

無特殊禁忌。

準備

留取待檢標本。

方法

1.尿液尿卟啉檢查法
(1)取新鮮尿4ml於試管中,加10滴冰乙酸混合。
(2)加入1ml戊醇,並振搖試管數次,待分層。
(3)在暗室中,用濾過紫外線燈觀察戊醇層(上層),灰藍色為陰性,粉紅或紅色螢光為陽性。
2.尿液糞卟啉檢查法
(1)取新鮮尿液20ml放於試管中,加冰乙醇0.5ml和3%過氧化化氫2~3滴。
(2)再加入4ml乙醚,振搖試管數次,待分層。
(3)在暗室中,用濾過紫外線燈觀察乙醚層(上層),灰白或藍綠色為陰性,粉紅或紅色螢光為陽性。
3.尿液卟膽原檢查法
(1)取新鮮尿液2ml放於試管中,加2ml對二甲氨基苯甲醛,靜置3min。
(2)加飽和醋酸鈉溶液4ml,混合後加氯仿3ml,充分振搖,待分層。
(3)觀察上層水溶液,紅色為陽性反應。
4.糞便卟啉的檢查法
(1)取一小塊糞便(約0.5g)放於試管中,加冰乙酸0.5ml,用玻璃棒攪成糊狀。
(2)加4ml乙醚,再攪拌充分,靜置。
(3)將上層清液(醋酸醚層)輕輕倒入另一試管中,加1.5mol/L鹽酸2ml,充分振搖,待分層。
(4)在暗室中,用濾過紫外線燈觀察下層(酸層),灰白或灰藍色為陰性,粉紅或紅色螢光為陽性。
5.紅細胞中卟啉檢查法
(1)在試管中加混合試劑(乙醚∶冰乙酸=4∶1)5ml和末梢血4滴(0.2ml),用玻璃棒將小凝塊攪碎。
(2)取上清液加入另一試管中,加3mol/L鹽酸1ml,振搖數次,待分層。
(3)在暗室中,用濾過紫外線燈觀察下層(酸層),無色為陰性,粉紅或紅色螢光為陽性。
6.紅細胞中卟啉的螢光鏡計數法
(1)試管中放1ml生理鹽水,加末梢血2滴,搖勻後滴在玻片上(玻片上刻有小方格)。
(2)在螢光顯微鏡下計數小方格內發亮紅色螢光的紅細胞,再在普通顯微鏡下計數紅細胞總數,計算出螢光紅細胞的百分比。正常人螢光紅細胞無或偶見(5%為異常。

注意事項

1.應取新鮮標本。
2.標本、試劑的比例應適當。
3.應充分搖勻,避免反應不充分。

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