凝膠過濾法

凝膠過濾法,又稱分子排阻法, 凝膠過濾法所用的介質為凝膠珠,其內部為多孔網狀結構。

基本介紹

  • 中文名:凝膠過濾法
  • 領域:化學
  • 成分:凝膠
  • 別名:分子排阻法
凝膠過濾,英文Gel filtration
凝膠過濾法,一定型號的凝膠網孔大小一定,只允許相應大小的分子進入凝膠顆粒內部,大分子則被排阻在外。洗脫時,大分子隨洗脫液從顆粒間隙流下來,洗脫液體積小,小分子則在顆粒網狀結構中穿來穿去,歷程長,後洗脫下來,洗脫體積大。
缺點:從凝膠過濾的原理可知,蛋白質分子通過凝膠柱的速度(即洗脫體積的大小)並不直接取決於分子的質量,而是它的斯篤克半徑,利用凝膠過濾法測定蛋白質分子量時,標準蛋白質(已知分子量和斯篤克半徑)和待測蛋白質必須具有相同的分子形狀(接近球體),否則不能得到比較準確的分子量。分子形狀為線形的或與凝膠能發生吸附作用的蛋白質,則不能用此方法測定分子量。而且柱子成本比較高,整個實驗過程耗時很長。

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