光激化學發光

光激化學發光（Light Initiated Chemiluminescent Assay，LiCA）是一種均相免疫檢測技術，屬於化學發光技術之一。

該技術最初由Ullman等在1994年報導，美國德靈公司研發成功，後由PerkinElmer公司生產相關試劑(AlphaScreen)，西門子公司生產出免疫診斷試劑（LOCI）。國產光激化學發光免疫檢測系統由上海博陽公司建立在該技術之上。

基本介紹

• 中文名：光激化學發光
• 外文名：Light Initiated Chemiluminescent Assay
• 簡稱：LiCA
• 套用：多種生物分子的測定

反應原理

光激化學發光（Light Initiated Chemiluminesence Assay,LiCA）技術使用的是均相體系化學發光檢測技術，參與免疫反應的一個抗體上包被了感光珠（sensibead），內含酞菁（魯米諾類化學發光物質）；另一個抗體上包被了發光珠（chemibead），內含二甲基噻吩衍生物及Eu螯合物。在目標抗原存在的情況下，可形成夾心免疫複合物，目標抗原可使兩個抗體上標記的感光珠和發光珠緊密的連線在一起，在680nm激發光下，可完成魯米諾氧途徑化學發光過程。

優勢

1. 光激化學發光（LiCA）的免疫反應屬於均相反應模式，包被有抗體或抗原的感光珠與發光珠均勻分布在反應體系中，在分子作用力下自由運動，能更快速、充分的完成免疫反應，所以光激化學發光（LiCA）的免疫反應時間更短。
   
2. 整個反應過程無需清洗和分離未結合的樣本和試劑，降低了反應的系統誤差，提高免疫反應的魯棒性
   
3. 從激發光→高能態氧離子→發光珠→光信號四個反應的信號傳遞過程具有放大效應，且發光迅速，保證了測定的敏感性，提高了結果的靈敏度。
   
4. 整個能量（光）的產生、傳遞和放大過程十分穩定，不易受到pH值、離子強度和溫度的影響。
   

檢測原理

1. 光激化學發光（LiCA）依賴於兩種微粒相互接近而完成的化學能量傳遞是實現均相反應的基礎，通常在反應體系中，微粒的濃度很低，故兩種微粒相互隨機碰撞的幾率很低，因此反應體系的本底非常微弱。
   
2. 如果包被在微粒表面的生物分子發生相互作用，拉近兩個微粒的距離，例如形成免疫夾心複合物或受體-配體複合物，這樣就能連通能量傳遞鏈：感光珠接受激發光產生單線態氧，單線態氧把能量傳遞至距離感光珠200nm範圍內的發光珠，最終產生光信號。
   
3. 如果在感光珠附近200nm的範圍內沒有發光珠，單線態氧就會衰變到基態氧進入下一個能量循環，這時就沒有光信號產生。
   

套用範圍

光激化學發光（LiCA）技術可套用到多種生物分子的測定，包括酶活性、受體-配體反應、低親和力的反應、第二信使水平、DNA、RNA、蛋白質、多肽、碳水化合物。