亨蓋特滾管技術

此法由著名美國微生物學家R.E.Hungate於1950年設計,故名。這是厭氧菌微生物學發展歷史中的一項具有劃時代意義的創造,由此推動了嚴格厭氧菌(如瘤胃微生物區系和產甲烷菌等)的分離和研究。

其主要原理是利用除氧銅柱(玻璃柱內裝有密集銅絲,用電熱法加溫至350 ℃時,可使通過柱體的不純氮中的氧氣與銅發生氧化反應而被除去)來製備高純氮,再用此高純氮去驅除培養基配製、分裝過程中各種容器和小環境中的空氣,使培養基的配製、分裝、滅菌和貯存,以及菌種的接種、稀釋、培養、觀察、分離、移種和保藏等操作的全過程始終處於高度無氧條件下,從而保證了各類嚴格厭氧菌的存活。用嚴格厭氧方法配製、分裝、滅菌後的厭氧菌培養基,稱為預還原無氧滅菌培養基即PRAS培養基。

基本介紹

  • 中文名:亨蓋特滾管技術
  • 外文名:Hengate Rolling Tube Technology
  • 創造:R.E.Hungate於1950年設計
  • 推動:推動了嚴格厭氧菌的分離和研究
  • 培養基:PRAS培養基
  • 優點:有利於阻止氧與厭氧菌接觸
簡介,原理,器材,優點,

簡介

此法由著名美國微生物學家R.E.Hungate於1950年設計,故名。這是厭氧菌微生物學發展歷史中的一項具有劃時代意義的創造,由此推動了嚴格厭氧菌(如瘤胃微生物區系和產甲烷菌等)的分離和研究。

原理

其主要原理是利用除氧銅柱(玻璃柱內裝有密集銅絲,用電熱法加溫至350 ℃時,可使通過柱體的不純氮中的氧氣與銅發生氧化反應而被除去)來製備高純氮,再用此高純氮去驅除培養基配製、分裝過程中各種容器和小環境中的空氣,使培養基的配製、分裝、滅菌和貯存,以及菌種的接種、稀釋、培養、觀察、分離、移種和保藏等操作的全過程始終處於高度無氧條件下,從而保證了各類嚴格厭氧菌的存活。用嚴格厭氧方法配製、分裝、滅菌後的厭氧菌培養基,稱為預還原無氧滅菌培養基即PRAS培養基。

器材

在進行產甲烷菌等嚴格厭氧菌的分離時,可先用Hungate的這種無氧操作把菌液稀釋,並用注射器接種到裝有融化後的PRAS瓊脂培養基試管(見圖)中,該試管用密封性極好的丁基橡膠塞嚴密塞住後平放,置冰浴中均勻滾動,使含菌培養基布滿在試管內表面上(猶如將好氧菌澆注或塗布在培養皿平板上那樣),經培養後,會長出許多單菌落。
亨蓋特滾管技術

優點

滾管技術的優點是試管內壁上的瓊脂層有很大的表面積可供厭氧菌長出單菌落,但試管口的面積和試管腔體積都極小,因而特別有利於阻止氧與厭氧菌接觸。

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