二氨基聯苯胺

二氨基聯苯胺(Diaminobenzidine,DAB)是辣根過氧化物酶最敏感、最常用的顯色底物,反應產物因不溶於水、二甲苯和醇的棕色沉澱物而被廣泛地用於蛋白印跡(Western Blot,WB)、免疫組織化學(Immunohistochemistry,IHC)和免疫細胞化學(Immunocytochemistry,ICC)、斑點印跡(Dot blot)和生物晶片(Biochip)等的染色和顯色反應

基本介紹

  • 中文名:二氨基聯苯胺
  • 外文名:Diaminobenzidine,DAB
  • 保存條件:在-20℃,避光、密封保存
  • 化學性質:不穩定
保存條件,使用說明,注意事項,

保存條件

試劑盒應在-20℃,避光、密封保存。

使用說明

使用前先用蒸餾水將B顯色液(1:25)稀釋為工作液,然後按比例(1:25)加入A顯色液,混勻後立即使用。顯色時間1-30分鐘,顯色時間過長可引起本底增高,故應密切觀察顯色過程(一般3-10分鐘最理想),並在本底較淺且達到適當顯色強度時以流水漂洗終止顯色反應
稀釋方法:取去離子水920ul,加入B顯色液40ul混勻,再加入40ul的A顯色液,混勻後即可使用。工作液建議用量:免疫組化50-100ul/切片,WB每張膜200-5000ul/膜

注意事項

1. DAB溶液應低溫密封保存。如有結晶析出,應確保結晶完全溶解再行使用;
2. 顯色工作液應現用現配,新鮮配製的工作液應為無色或淺棕色,如顏色過深,請勿使用;
3. DAB在常溫下不穩定,每次取用後均應及時加蓋密封放回冰櫃,以免因DAB分解影響實驗,或因滲漏造成實驗環境污染;
4. DAB有潛在致突變作用,操作時應注意穿戴好防護用具。

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