超濾離心管,備有四種材質的超濾膜:聚醚碸、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據不同要求靈活選用;
兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取並回收,又可將離心管放入離心機反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使濃縮液達到近乎完全回收;
截留分子量廣泛,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚碸膜;
最新推出專利產品Hydrosart膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。
使用注意事項
(1)選擇合適的超濾管。通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同。
(2)新買來的超濾是乾燥的,使用前加入超純水,水量完全過膜,冰浴或冰櫃里預冷幾分鐘。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為準。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
(3)平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預冷至4度)。不同離心機的轉速 rpm換算成g之後,有所不同。離心機的加速度調至最低檔,減小對膜的壓力。注意,一定要等離心機達到目的轉速之後,方可離開離心機,否則離心機出問題時,無法第一時間處理。膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
(4)當濃縮到剩下1ml時,取50ul緩衝溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mgml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱,導致堵管。若發生沉澱,要確定沉澱的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,後者的方法是換不同的緩衝溶液,直到蛋白不發生沉澱為止。
(5)前面幾步用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經0.22um超濾膜超濾),再 濃縮至1ml左右,連續三次,最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定,一般不多於500ul,也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。
Nanosep& Nanosep MF超濾離心管
僅需5到15分鐘,即可對50到500μL樣本進行簡便、可靠的濃縮與脫鹽處理
— 快速處理樣本。
— 通常,回收率高於90%;備有低蛋白質結合的Omega™、Bio-Inert®或GHP濾膜可供選擇。
— 對應各種截留分子量,備有各種編碼以供輕鬆識別的顏色可供選擇。
— 結構材料為低結合聚丙烯。
— 超聲焊接密封,防止側流或密封不嚴。
— 適用於配合1.5mL試管的標準離心轉子。
套用
— 寡核苷酸、DNA和RNA的濃縮、純化及脫鹽。
— 純化標記和PCR反應。
— 從瓊脂糖凝膠切片中分離DNA。
— 從丙烯醯胺凝膠中分離寡核苷酸和RNA。
— 如果要求去除引物,無論分子量大小為何,濃縮PCR產物時,都必須使用100K離心管。
處理能力
最大樣本體積:500μL
最終濃縮體積:15μL
濾出液接收容器的容積:500μL
死體積 (濾膜/支撐物):<5μL
工作溫度範圍
0 - 40℃(32 - 104 °F)
pH值範圍
Nanosep離心管:1-14
Nanosep MF(微孔濾膜)離心管:3-14
最大離心力
14,000 xg
離心機要求
轉子配合1.5mL試管
消毒
產品提交時未經滅菌處理;使用前消毒,可使70%濃度的乙醇過濾。
訂購信息
Nanosep離心管,Omega™濾膜
部件編號 | 說明 | 包裝 |
OD003C33 | 3K,灰色 | 24/pkg |
OD003C34 | 3K,灰色 | 100/pkg |
OD003C35 | 3K,灰色 | 500/pkg |
OD010C33 | 10K,藍色 | 24/pkg |
OD010C34 | 10K,藍色 | 100/pkg |
OD010C35 | 10K,藍色 | 500/pkg |
OD030C33 | 30K,紅色 | 24/pkg |
OD030C34 | 30K,紅色 | 100/pkg |
OD030C35 | 30K,紅色 | 500/pkg |
OD100C33 | 100K,透明 | 24/pkg |
OD100C34 | 100K,透明 | 100/pkg |
OD100C35 | 100K,透明 | 500/pkg |
OD300C33 | 300K,桔色 | 24/pkg |
OD300C34 | 300K,桔色 | 100/pkg |
OD300C35 | 300K,桔色 | 500/pkg |
Nanosep MF離心管,Bio-Inert濾膜
部件編號 | 說明 | 包裝 |
ODM02C33 | 0.2µm,淺綠色 | 24/pkg |
ODM02C34 | 0.2µm,淺綠色 | 100/pkg |
ODM02C35 | 0.2µm,淺綠色 | 500/pkg |
ODM45C33 | 0.45µm,褐紅色 | 24/pkg |
ODM45C34 | 0.45µm,褐紅色 | 100/pkg |
ODM45C35 | 0.45µm,褐紅色 | 500/pkg |
Nanosep MF離心管,GHP濾膜
部件編號 | 說明 | 包裝 |
ODGHPC34 | 0.45µm,透明 | 100/pkg |
ODGHPC35 | 0.45µm,透明 | 500/pkg |
單可靠的濃縮和除鹽操作