cRNA探針是以cDNA為模板,通過體外轉錄而獲得的。因為它是一種單鏈探針,因此也避免了套用雙鏈cDNA探針做雜交反應時存在的兩條之間的復性問題。cRNA與RNA之間形成的雜交體要比cDNA-RNA雜交體穩定。cRNA-RNA之間形成的雜交體不受RNA酶的影響。因此雜交反應後可用RNA酶處理,以除去未結合的探針。
基本介紹
- 中文名:cRNA探針
- 套用:原位雜交中
cRNA探針是以cDNA為模板,通過體外轉錄而獲得的。因為它是一種單鏈探針,因此也避免了套用雙鏈cDNA探針做雜交反應時存在的兩條之間的復性問題。cRNA與RNA之間形成的雜交體要比cDNA-RNA雜交體穩定。cRNA-RNA之間形成的雜交體不受RNA酶的影響。因此雜交反應後可用RNA酶處理,以除去未結合的探針。
基因探針,即核酸探針,是一段帶有檢測標記,且順序已知的,與目的基因互補的核酸序列(DNA或RNA)。基因探針通過分子雜交與目的基因結合,產生雜交信號,能從浩瀚的基因組中把目的基因顯示出來。根據雜交原理,作為探針的核酸序列至少必須具備...
探針屬於高效分析試劑,其最大特點在於專一性強、靈敏度高。探針技術在生物大分子研究、藥物分析、司法鑑定、臨床疾病診斷和治療等方面發揮著巨大的作用。基於核酸分子雜交原理的核酸探針是最常見的一類探針,另外還有金屬離子探針和有機小...
它們是DNA雜交探針技術與半導體工業技術相結合的結晶。該技術系指將大量探針分子固定於支持物上後與帶螢光標記的DNA樣品分子進行雜交,通過檢測每個探針分子的雜交信號強度進而獲取樣品分子的數量和序列信息。生物晶片技術起源於核酸分子雜交。...
重點比較了載體交聯法、粘附法、蛋白A法和物理吸附法固定核酸探針和抗體與新的電極回複方法的優缺點,研製出用於腫瘤壞死因子和B肝核酸病毒分子壓電感測器和用於B肝表面抗原、人體纖維蛋白、牛血清白蛋白,LgG,補體成分C1q、C3、C4、C9、...
穩定性同位素核酸探針,(DNA/RNA-SIP)技術。分子生物學技術作為一種手段,為21世紀土壤科學特別是土壤微生物學的跨越發展提供了重要支撐。採用穩定性同位素示蹤複雜土壤生命體系的遺傳信息,如微生物核酸DNA/RNA,進一步分析13C-DNA/RNA,...
套用高敏感度的放射性標記cRNA探針在理想的ISHH的實驗條件下檢測mRNA,其敏感度可達到20個mRNA拷貝/每個細胞。由於雙鏈DNA的穩定性,在用ISHH定位DNA時很少發生丟失,降解,其敏感性高到能夠顯示在染色體鋪片上,有時甚至在組織切片上的...
一、地高辛(Dig)標記DNA探針在 石蠟切片檢測病毒DNA的方法 二、生物素標記HPvDNA探針在石蠟 切片上檢測HPv-DNA的方法 第四節 RNA原位核酸雜交方法 一、基本原理 二、RNA原位雜交 三、cRNA探針檢測組織切片中RNA的原位雜交 四、冰凍切片...
第十三章 cRNA探針原位分子雜交單、雙標技術的套用 第十四章 寡核苷酸探針原位雜交技術檢測大鼠脊髓中NGF家族及其受體mRNA的表達 第十五章 Western印跡技術在檢測全橫斷脊髓損傷大鼠神經幹細胞移植後NGF變化中的套用 第十六章 Northern印跡...
4.6.1 膠體金探針的製備技術 4.6.2 膠體金標記電鏡技術的套用 4.7 電鏡原位雜交技術 4.7.1 同位素標記cRNA探針電鏡原位雜交 4.7.2 生物素標記DNA探針電鏡原位雜交 4.7.3 地高辛標記rRNA探針電鏡原位雜交 4.7.4 電鏡原位雜交...
分子雜交基因探針根據標記方法不同可粗分為放射性探針和非放射性探針兩大類,根據探針的核酸性質不同又可分為DNA探針,RNA探針,cDNA探針,cRNA探針及寡核苷酸探針等幾類,DNA探針還有單鏈和雙鏈之分。下面分別介紹這幾種探針。DNA探針...
劉愛平,劉兢,張曉燕,阮迪雲(1999)。地高辛標記cRNA探針原位雜交檢測大鼠腦NMDAR-LmRNA。中國科學技術大學學報,29,565-568。王琛,李昀,李平,劉兢等(2000)。表面表位包埋法製備腫瘤表面抗原P185neu/erbB-2單克隆抗體及其性質研究。
第二節 核酸探針的種類、製備及標記 一、探針的種類和製備 二、探針的標記 第三節 不同探針在原位雜交組織化學中的套用 一、cRNA探針在原位雜交組織化學中的套用 二、DNA及寡核苷酸技術在原位雜交組織化學中的套用 第四節 原位雜交...
2、於95℃加熱5~10min,滅活反轉錄酶,使RNA—cDNA雜交體變性,然後迅速冰浴冷卻:3、PCR擴增:方法基本同PCR。cDNA第一鏈合成方法:20ul反應液中含10xPCR擴增緩衝液,2ul;四種dNTP(10 mmol/L)2ul;RNA酶抑制劑20U;mRNA,l...
核酸探針標記 核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據是否使用放射性標記物的與否,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針;根據是否存在互補鏈,可分為單鏈和雙鏈探針;根據放射性標記物摻入情況,可分為均勻標記和末端標記探針...
