菌落雜交法

菌落雜交法 colony hybridization method

以質粒為載體進行DNA克隆繁殖所用的方法,即從多數寄主菌的菌落中,將含特定的鹼基排列順序的DNA,通過與其鹼基排列順序互補的RNA或DNA雜交而進行檢出和選擇的方法。一般是使在瓊膠培養基上形成含有質粒的菌落後,在其上面壓附一層硝酸纖維素薄膜,將菌落移於薄膜上。

基本介紹

  • 中文名:菌落雜交法
  • 外文名:colony hybridization method
  • 載體:質粒
  • 作用:DNA克隆繁殖
用鹼處理同時引起溶菌和DNA變性後,在薄膜上各個群落的位置上分別將變性的DNA固定起來,然後與用放射性同位素標記的特定的RNA或DNA片斷雜交,再用放射自顯影法來鑑別含有所希望的DNA排列順序的寄主菌的菌落,最後從原來的瓊膠培養基上的菌落中選出其相應的材料。

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