琥珀突變型

琥珀突變型簡寫為am。無意義突變的一種。因鹼基置換而產生的突變,使對應於某種胺基酸的密碼子變為琥珀密碼子UAG。這是以最初與埃皮施泰因和施泰因貝格(R.H.Epistein和C.M.Steinberg)一起從T4 噬菌體中分離這種突變株的貝爾施泰因(H.Bernte- in)的名字來命名的。因為德語Bernstein(琥珀)的英譯為amber,所以稱這種突變為琥珀型突變。

目的:構建帶有琥珀突變的輔助病毒VCSM13N1,為建立選擇感染性噬菌體(SIP)技術平台奠定基礎。方法:選擇輔助病毒VCSM13蛋白ⅢN1區的Q51作為靶位點,採用重疊延伸PCR方法對其進行定點突變,經酶切及序列分析進行確認;噬斑計數法檢測該琥珀突變在允許和非允許菌株中的開、關效應;以HBsAg抗體作為模式體系來確定該突變子作為輔助病毒的可行性,並對其性能進行綜合評價。結果:獲得了琥珀突變子VCSM13N1,在允許菌株XL1-Blue中其滴度達到2.5×1011,與野生型VCSM13相似(4×1011),而用非許可菌株HB2151進行噬斑計數時,滴度在106水平,降低了數萬倍。來源於菌株HB2151的突變病毒感染XL1-Blue計數噬斑,其滴度最高為5×109,降低了50倍;以其在許可菌中製備HBsAg噬菌體抗體,可以得到與野生型相似的結果。結論:琥珀突變子VCSM13N1可以作為輔助病毒,而且在非允許菌株HB2151中有一定的關閉效應。

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