基本介紹
內容簡介,目錄,前言,
內容簡介
《現代分子生物學模組實驗指南》由10個模組組成，分為核酸提取與分子雜交，目的基因的合成與檢測，大規模基因差異表達分析，蛋白質樣品的製備、分離與鑑定，目的蛋白質的表達、純化與檢測，蛋白質相互作用的研究，分子標記技術的比較與套用，目的基因的遺傳轉化，雷射共聚焦顯微鏡的套用，生物信息學與網路套用等內容。
《現代分子生物學模組實驗指南》具有以下特色：①把現代分子生物學的經典及前沿研究技術分成若干個模組，模組內的實驗相互有機聯繫形成一個小的研究專題，使學生通過實驗理解研究內容，提高學生的研究能力，達到研究型教學的目的； ②每章設有模組的實驗目的和模組的實驗流程圖，使學生對實驗的目的和流程有一個系統的了解和掌握；③實驗方法與主要結果附圖，具有一定的示範實驗的作用；④每個模組都設有注意事項與建議，提高了學生的實驗操作技巧與成功機率；⑤編人大量的前沿研究技術，對培養本科生的研究能力及研究生研究使用都很有幫助。
《現代分子生物學模組實驗指南》實驗體系新穎、方法先進、技術全面，可作為生物、農林、醫學專業本科生、研究生的分子生物學實驗教材和相關科研人員的參考書。
目錄
模組一 核酸提取與分子雜交
1-1 DNA的提取與Sotlthern雜交
1-2 RNA的提取與Northern雜交
1-3原位雜交分析
模組二 目的基因的合成及檢測
2-1 CDNA末端快速擴增法合成目的基因
2-2 目的基因的克隆
2-3 目的基因的序列分析
模組三 大規模基因差異表達分析
3-1 抑制消減文庫的建立
3-2 特異基因的序列測定
3-3 序列比對與基因注釋
3-4 基因晶片分析
模組四 目的蛋白質表達、純化與檢測
4-1 目的基因原核表達質粒的構建
4-2 谷胱甘肽一S一轉移酶融合蛋白的表達與純化
4-3 組氨酸標籤融合蛋白的表達與純化
4-4 免疫印跡檢測目的蛋白質的表達
模組五 蛋白質樣品的製備、分離與鑑定
5-1 蛋白質樣品的製備
5-2 蛋白質的定量
5-3 SDS一聚丙烯醯胺凝膠電泳分離蛋白質
5-4 雙向電泳分離蛋白質
5-5 二維液相色譜分離蛋白質
5-6 蛋白質的質譜鑑定
模組六 蛋白質相互作用的研究
6一1 酵母雙雜交
6-2 T7噬茵體展示篩選技術
6-3 Pull-down分析蛋白質相互作用
6-4 免疫共沉澱
模組七 分子標記技術的比較與套用
7-1 SSR分子標記技術
7-2 改良AFLP分子標記技術
7-3 相關分子標記技術概述
模組八 目的基因的遺傳轉化
8-1 PCR法克隆目的基因全長
8-2 Gateway技術構建表達載體
8-3 農桿菌真空滲入法遺傳轉化
8-4 水稻愈傷組織的遺傳轉化
8-5 RNAi髮夾式載體的構建及轉化
模組九 雷射掃描共聚焦顯微鏡的套用
9-1 雷射掃描共聚焦顯微鏡的基本使用
9-2 花粉管內鈣離子梯度分布的觀察
9-3 雷射掃描共聚焦顯微鏡檢測螢光蛋白
模組十 生物信息學與網路套用
10-1 基因序列分析
10-2 蛋白質結構以及相互作用預測
附錄
前言
科學與技術從來都是相輔相成、互促共進的一對孿生兄弟，科學為技術的發明與提升提供理論依據，技術為科學的發現與研究提供方法手段。20世紀70年代建立的“遺傳工程”是Paul Bet’g和他的合作者將許多獨立的技術要素相互聯繫，形成網路後的一項重要的技術集成。這一技術創造性地實現了不同物種DNA分子的體外遺傳重組，不僅引發了一場分子生物學革命，而且被科學界評價為與watson和Crick發現DNA雙螺旋結構模型具有同樣的開拓性價值。Kary B．MulIis發明了DNA擴增的PCR技術，儘管它本身並未開闢分子生物學新的研究領域，但它卻使一些既無法實施，又無法深入的研究領域迅速獲得成功與突破。毫無疑問，這項簡單而又晚熟的技術發明對分子生物學研究的影響程度超過了其他任何技術，它的套用領域也幾乎超過了其他任何技術。
分子生物學的發展不僅得益於不同學科的相互滲透，而且在極大程度上取決於實驗技術、研究手段的不斷革新與發明。現代分子生物學已從一門“觀察性”和“驗證性”的科學發展成為一門“干涉性”和“創造性”的科學。學生只有在學習分子生物學基本理論的同時，不斷強化分子生物學實驗技能的訓練，才能為全面提高從事科學研究、技術發明、產品開發的綜合創新能力奠定基礎。
