《水泡性口炎補體結合試驗操作規程(SN/T 1166.1-2002)》內容簡介：水泡性口炎（Vesicular Stomatitis，VS）補體結合試驗在參考國際獸疫局（OIE）《哺乳動物、禽和蜜蜂A和B類疾病診斷試驗和疫苗標準手冊》和實踐經驗的基礎上制定。 《水泡性口炎補體結合試驗操作規程(SN/T 1166.1-2002)》的附錄A為規範性附錄。 《水泡性口炎補體結合試驗操作規程(SN/T 1166.1-2002)》由國家認證認可監督管理委員會提出並歸口。
基本介紹
- 書名：水泡性口炎補體結合試驗操作規程
- 作者：中華人民共和國 國家質量監督檢驗檢疫總局
- 出版日期：2003年3月1日
- 語種：簡體中文
- ISBN：155066215024
- 外文名：Protocol of Complement Fixation Test for Vesicular Stomatitis
- 出版社：中國標準出版社
- 頁數：5頁
- 開本：16
- 品牌：中國標準出版社
內容簡介,文摘,編輯推薦,
內容簡介
《水泡性口炎補體結合試驗操作規程(SN/T 1166.1-2002)》由中國標準出版社出版。
文摘
著作權頁：
插圖：
1範圍
本標準規定了水泡性口炎補體結合試驗方法。
本標準適用於動物水泡性口炎病毒抗原檢測。
2規範性引用檔案
下列檔案中的條款通過在標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用檔案，其隨後所有的修改單（不包括勘誤的內容）或修訂版均不適用於本標準，然而，鼓勵根據本標準達成協定的各方研究是否可使用這些檔案的最新版本。凡是不注日期的引用檔案，其最新版本適用於本標準。
GB/T 6682－1992 分析實驗室用水規格和試驗方法（eqv ISO 3696：1987）
3縮略語
下列縮略語適用於本標準。
3.1 CF：補體結合試驗。
3.2 CH50：50%補體溶血單位。
3.3 VSV：水泡性口炎病毒。
3.4 VSV－NJ：水泡性口炎病毒新澤西型；VSV－IND水泡性口炎病毒印地安那型。
3.5 VBD：巴比妥緩衝液。
3.6 PBS：磷酸鹽緩衝液。
4原理
補體結合試驗包括兩個系統，第一系統為反應系統，即已知抗原（或抗體），被檢血清（或抗原）和補體。第二系統為指示系統（亦稱溶血系統），即溶血素加綿羊紅細胞，溶血素即抗綿羊紅細胞抗體。補體常用豚鼠血清，它對紅細胞具有較強的裂解能力。補體只能與抗原一抗體複合物結合併被激活產生溶血作用。因此，如果試驗系統中的抗原和抗體是對應的，形成了免疫複合物，定量的補體就被結合，這時加入指示系統，由於缺乏游離補體，就不產生溶血，即為陽性反應。反之試驗系統中缺乏抗原或特異性抗體，不能形成免疫複合物補體就游離於反應液中，被指示系統，即溶血素加綿羊紅細胞免疫複合物激活，發生溶血，即陰性反應。
5試劑和材料
5.1溶血素：由指定單位提供。也可用50%的綿羊紅細胞連續免疫家兔而獲得兔抗綿羊紅細胞血清，即溶血素。
5.2補體：由指定單位提供。也可採集健康的公豚鼠血清，2隻～3隻豚鼠血清混合，分裝成每小管1 mL，置於－25℃以下低溫凍結保存使用。
5.32.8%綿羊紅細胞懸液的製備：可直接購買保存於阿氏液中的綿羊紅細胞。也可自行採血，保存於阿氏液中。用前用冷VBD離心洗滌三次至上清液清亮。若三次離心仍不能使上清液清亮，則應更換新批號的紅細胞。取離心沉澱的綿羊紅細胞（按離心管上的刻度定即可）2.8 mL，加97.2 mL的VBD，搖勻即成。
5.4病毒：VSV－NJ和VSV－IND國際標準毒株，由指定單位提供。
5.5標準陽性對照抗原和標準陰性抗原的製備：見附錄A。
5.6標準陽性血清：VSV－NJ和VSV－IND血清效價應達到1：16以上。由指定單位提供。
5.7標準陰性血清：VSV－NJ和VSV－IND標準陽性血清互為陰性血清對照。由指定單位提供。
5.8BD稀釋液：見附錄A。
5.9磷酸鹽緩衝液（PBS）：見附錄A。
5.10水：符合GB/T 6682－1992分析實驗室二級水規格。
插圖：
1範圍
本標準規定了水泡性口炎補體結合試驗方法。
本標準適用於動物水泡性口炎病毒抗原檢測。
2規範性引用檔案
下列檔案中的條款通過在標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用檔案，其隨後所有的修改單（不包括勘誤的內容）或修訂版均不適用於本標準，然而，鼓勵根據本標準達成協定的各方研究是否可使用這些檔案的最新版本。凡是不注日期的引用檔案，其最新版本適用於本標準。
GB/T 6682－1992 分析實驗室用水規格和試驗方法（eqv ISO 3696：1987）
3縮略語
下列縮略語適用於本標準。
3.1 CF：補體結合試驗。
3.2 CH50：50%補體溶血單位。
3.3 VSV：水泡性口炎病毒。
3.4 VSV－NJ：水泡性口炎病毒新澤西型；VSV－IND水泡性口炎病毒印地安那型。
3.5 VBD：巴比妥緩衝液。
3.6 PBS：磷酸鹽緩衝液。
4原理
補體結合試驗包括兩個系統，第一系統為反應系統，即已知抗原（或抗體），被檢血清（或抗原）和補體。第二系統為指示系統（亦稱溶血系統），即溶血素加綿羊紅細胞，溶血素即抗綿羊紅細胞抗體。補體常用豚鼠血清，它對紅細胞具有較強的裂解能力。補體只能與抗原一抗體複合物結合併被激活產生溶血作用。因此，如果試驗系統中的抗原和抗體是對應的，形成了免疫複合物，定量的補體就被結合，這時加入指示系統，由於缺乏游離補體，就不產生溶血，即為陽性反應。反之試驗系統中缺乏抗原或特異性抗體，不能形成免疫複合物補體就游離於反應液中，被指示系統，即溶血素加綿羊紅細胞免疫複合物激活，發生溶血，即陰性反應。
5試劑和材料
5.1溶血素：由指定單位提供。也可用50%的綿羊紅細胞連續免疫家兔而獲得兔抗綿羊紅細胞血清，即溶血素。
5.2補體：由指定單位提供。也可採集健康的公豚鼠血清，2隻～3隻豚鼠血清混合，分裝成每小管1 mL，置於－25℃以下低溫凍結保存使用。
5.32.8%綿羊紅細胞懸液的製備：可直接購買保存於阿氏液中的綿羊紅細胞。也可自行採血，保存於阿氏液中。用前用冷VBD離心洗滌三次至上清液清亮。若三次離心仍不能使上清液清亮，則應更換新批號的紅細胞。取離心沉澱的綿羊紅細胞（按離心管上的刻度定即可）2.8 mL，加97.2 mL的VBD，搖勻即成。
5.4病毒：VSV－NJ和VSV－IND國際標準毒株，由指定單位提供。
5.5標準陽性對照抗原和標準陰性抗原的製備：見附錄A。
5.6標準陽性血清：VSV－NJ和VSV－IND血清效價應達到1：16以上。由指定單位提供。
5.7標準陰性血清：VSV－NJ和VSV－IND標準陽性血清互為陰性血清對照。由指定單位提供。
5.8BD稀釋液：見附錄A。
5.9磷酸鹽緩衝液（PBS）：見附錄A。
5.10水：符合GB/T 6682－1992分析實驗室二級水規格。
編輯推薦
《水泡性口炎補體結合試驗操作規程(SN/T 1166.1-2002)》由中國標準出版社出版。
