所謂同聚物加尾法就是利用末端轉移酶在載體及外源雙鏈DNA的3’端各加上一段寡聚核苷酸，製成人工黏性末端，外源DNA和載體DNA分子要分別加上不同的寡聚核苷酸，如dA(dG)和dT(dC),然後在DNA連線酶的作用下連線成為重組的DNA。
基本介紹
- 中文名：同聚物加尾法
- 優點：2個
- 缺點：2個
- 利用媒介：末端轉移酶的功能
- 轉移物：核苷酸
- 轉移標物：雙鏈DNA分子的突出或隱蔽的3'-OH
這種方法的核心是利用末端轉移酶的功能，將核苷酸轉移到雙鏈DNA分子的突出或隱蔽的3'-OH上。以Mg作為輔助因子，該酶可以在突出的3'-OH端逐個添加單核苷酸，如果用Co作輔助因子則可在隱蔽的或平末端的3'-OH端逐個添加單個核苷酸。
同聚物加尾法優點: 1)首先不易自身環化. 2)因為載體和外源片段的末端是互補的黏性末端，所以連線效率較高.3)用任何一種方法製備的DNA都可以用這種方法進行連線.缺點：(1)方法繁瑣；(2)外源片段難以回收。由於添加了許多同聚物的尾巴，可能會影響外源基因的表達.重組連線後往往會產生某種限制性內切核酸酶的切點.
用5’ 末端處理DNA片斷
